"RenCa epithelioid cells小鼠肾癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。 BJA-B-1细胞系相关产品:GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞 Granta 519细胞系相关产品:HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞 H-510A细胞系相关产品:HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞 细胞生长:贴壁 RenCa epithelioid cells小鼠肾癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:2传代 HCET细胞系相关产品:NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞 CEM clone 7细胞系相关产品:NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞 Fu97细胞系相关产品:KRC/Y细胞、T 84细胞、LN 229细胞 OCI Ly19细胞系相关产品:H-3255细胞、M-20细胞、HCC70细胞 KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 RenCa epithelioid cells小鼠肾癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞样 常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 COR-L23/P细胞系相关产品:RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞 WEHI-279细胞系相关产品:P31FUJ细胞、LICCF细胞、PC14细胞 Granta 519细胞系相关产品:HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞 COR-L51细胞系相关产品:C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞 NUGC4细胞系相关产品:HCEpiC细胞、IGROV-1细胞、TGW-nu-1细胞 C28/I2细胞系相关产品:CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞 32D/cl3细胞系相关产品:H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞 U-87MG细胞系相关产品:D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞 RMS1598细胞系相关产品:NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞 IMR 32细胞系相关产品:RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞 RenCa epithelioid cells小鼠肾癌细胞系 CL1细胞系相关产品:BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞 IOSE 80细胞系相关产品:H2330细胞、NALM-6细胞、FHC细胞 Fetal Rhesus Kidney-4细胞系相关产品:IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞 APRE-19细胞系相关产品:HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞 SW-1088细胞系相关产品:CEMO-1细胞、C17细胞、PL45细胞 Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞 K7M2细胞系相关产品:GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞 HBZY-1细胞系相关产品:OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞 MEG-01细胞系相关产品:NCI-H165细胞、CAL 33细胞、LOU-NH91细胞 IOSE80细胞系相关产品:NCI-H69C细胞、Jurkat E6-1细胞、MGECs细胞 Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞系相关产品:SCC VII细胞、OCI/AML5细胞、MONO-MAC 6细胞 P3JHR1细胞系相关产品:CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞 MES-SA Dx5细胞系相关产品:Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞 JeKo-1细胞系相关产品:UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞 NCI-H510A细胞系相关产品:G-292 clone A141B1细胞、H209细胞、CL1.0细胞 MC3T3-E1(C4)细胞系相关产品:FHCRC subclone 11细胞、PC 61.5.3细胞、P388D1细胞 Nb2-11细胞系相关产品:NCI-H2444细胞、L-363细胞、MFE 280细胞 COLO-320-HSR细胞系相关产品:OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞 alphaTC clone 6细胞系相关产品:L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞 MMAc.SF细胞系相关产品:PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞 HS852.T细胞系相关产品:HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞 B16 BL6细胞系相关产品:KOSC2细胞、HeLa/S3细胞、Jurkat-77细胞 SU86_86细胞系相关产品:HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞 PF382细胞系相关产品:FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞 Hs 737.T细胞系相关产品:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞 hTERT RPE1细胞系相关产品:RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞 H524细胞系相关产品:MN-60细胞、H1781细胞、GM3569细胞 Tu-177细胞系相关产品:MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞 SKMEL2细胞系相关产品:Tca-83细胞、SW1353细胞、GM04679细胞 SU-DHL-10细胞系相关产品:BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞系相关产品:B10BR细胞、C-33A细胞、HuH 6细胞 NCI-H2106细胞系相关产品:Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞 MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞 H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞 KMS-11细胞系相关产品:NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞 rUCMSCs细胞系相关产品:HEK.EBNA细胞、SB细胞、ME16C细胞 293/EBNA-1细胞系相关产品:SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞 RA-FLSs细胞系相关产品:HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞 NCIH1819细胞系相关产品:CW2细胞、SUM52PE细胞、SVEC 4-10细胞 hTERT-HME-1细胞系相关产品:293-EBNA细胞、HGF-1细胞、KOPN-8细胞 Y3-Ag123细胞系相关产品:C4-1细胞、SK RC 20细胞、Hep-G2/C3A细胞 U-226AR1细胞系相关产品:H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞 H-1651细胞系相关产品:A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞 A172细胞系相关产品:OCI-Ly 8细胞、SN12C-PM6细胞、RPMI-7951细胞 MB49细胞系相关产品:HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞 CL11细胞系相关产品:HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞 NCI-H920细胞系相关产品:HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞 IMR-90细胞系相关产品:LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞 KMS-18细胞系相关产品:MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞 HCC2218细胞系相关产品:Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞 MOLP8细胞系相关产品:D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞 RenCa epithelioid cells小鼠肾癌细胞系 SK Mel 24细胞系相关产品:Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞 C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞、KP2细胞 SKBr3细胞系相关产品:Hs-281-T细胞、A375-MEL细胞、H-1836细胞 GP5d细胞系相关产品:SKES-1细胞、GLRK 13细胞、VeroC1008细胞 "
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