"LN-18 epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。 RAMOS2G64C10细胞系相关产品:McCoy细胞、MADB106细胞、U-87MG细胞 HUSMC细胞系相关产品:H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞 ACC2细胞系相关产品:SUDHL-8细胞、GM637细胞、EFO27细胞 细胞生长:贴壁 LN-18 epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。 细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次 DV90细胞系相关产品:SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞 Hs 888.Lu细胞系相关产品:HT细胞、PL12细胞、P3J细胞 DSL-6A-C1细胞系相关产品:HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞 Astrocyte type I clone细胞系相关产品:NCI-SNU-1细胞、H2.35细胞、SHI1细胞 UCLA SO M21细胞系相关产品:MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 LN-18 epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞 常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 OSA细胞系相关产品:SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞 H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞 P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品:JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞 Hs 27细胞系相关产品:TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞 SKG-3a细胞系相关产品:TALL1细胞、NIT-1细胞、Hs 604.T细胞 NBLAN5T细胞系相关产品:KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞 hTERT-RPE1细胞系相关产品:Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞 Cor L51细胞系相关产品:NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞 E0771细胞系相关产品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞 MDA-MB-157细胞系相关产品:A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞 LN-18 epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系 LA 4细胞系相关产品:T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞 P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品:SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞 KP-N-RT-BM-1细胞系相关产品:OCIAML3细胞、KAT5细胞、578T细胞 Hs-343-T细胞系相关产品:FL83B细胞、RCK-8细胞、HCT FET细胞 OV1063细胞系相关产品:KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞 293细胞系相关产品:NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞 NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞 T-47D细胞系相关产品:149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞 HLE B-3细胞系相关产品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞 NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞 FHs 74 Int细胞系相关产品:KPL1细胞、H-510细胞、HEC-251细胞 P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品:IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞 MAVER-1细胞系相关产品:AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞 M-G63细胞系相关产品:SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞 C643细胞系相关产品:VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞 MEL细胞系相关产品:RS411细胞、QGP1细胞、TE 85 ClF-5细胞 HCC-9724细胞系相关产品:LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞 NKT细胞系相关产品:MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞 SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞 COLO-16细胞系相关产品:OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞 Madison细胞系相关产品:RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞 Buffalo Rat Liver-3A细胞系相关产品:VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞 J-82细胞系相关产品:293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞 NCIH1648细胞系相关产品:NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞 HG2855细胞系相关产品:P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞 HR-8348细胞系相关产品:MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞 PC-14细胞系相关产品:SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞 H-841细胞系相关产品:SUM 102PT细胞、MES-SA细胞、CEM/0细胞 P30/0HK细胞系相关产品:UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞 OCIAML3细胞系相关产品:BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞 HCC-1359细胞系相关产品:SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞 HCC-9724细胞系相关产品:LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞 2B4-L细胞系相关产品:SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞 TE3A细胞系相关产品:U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞 HT3细胞系相关产品:FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞 HBSMC细胞系相关产品:Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞 HOP62细胞系相关产品:UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞 MC-26细胞系相关产品:HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞 F-36P细胞系相关产品:Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞 MCF 7B细胞系相关产品:J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞 32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞 NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞 WEHI 164 TC细胞系相关产品:Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞 HCC-44细胞系相关产品:NU-GC-2细胞、BLO11细胞、TH1细胞 ID8细胞系相关产品:IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞 Mv1.Lu细胞系相关产品:MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞 KG1A细胞系相关产品:Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞 Human Embryonic Kidney 293细胞系相关产品:My-La 2059细胞、NKL细胞、NKL细胞 LN-18 epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系 H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞 SNU5细胞系相关产品:NCI-SNU-C2B细胞、Kasumi-1细胞、IB-RS2细胞 OCI AML5细胞系相关产品:H-1693细胞、RCC-4细胞、UMUC-3细胞 P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品:JJN-3细胞、NCCIT细胞、CAL27细胞 "
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