"GB-1 epithelioid cells人脑胶质母细胞瘤细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。 MDA157细胞系相关产品:Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞 HEL-92.1.7细胞系相关产品:H-35 Reuber细胞、SW620细胞、H-1836细胞 SHIN3细胞系相关产品:HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞 细胞生长:贴壁 GB-1 epithelioid cells人脑胶质母细胞瘤细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:1:2传代 WM266细胞系相关产品:KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞 B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞 LAN5细胞系相关产品:SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞 HEC-1-A细胞系相关产品:WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞 Caco 2细胞系相关产品:HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 GB-1 epithelioid cells人脑胶质母细胞瘤细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞 造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢! H-820细胞系相关产品:PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞 CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞 H295R细胞系相关产品:Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞 J774 A.1细胞系相关产品:SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞 NCI-H3255细胞系相关产品:CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞 EU-3细胞系相关产品:PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞 H28细胞系相关产品:H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞 LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞 3T3-442A细胞系相关产品:SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞 OVCAR-3细胞系相关产品:TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞 GB-1 epithelioid cells人脑胶质母细胞瘤细胞系 HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞 Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品:EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞 HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞 A-10细胞系相关产品:Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞 VP267细胞系相关产品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞 SNU-216细胞系相关产品:MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞 HME1细胞系相关产品:MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞 MAD109细胞系相关产品:Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞 BL-6细胞系相关产品:CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞 MonoMac 6细胞系相关产品:MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞 Hu-P-T3细胞系相关产品:OCM1细胞、NCI-H28细胞、526mel细胞 P3J-HR-1细胞系相关产品:HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞 Hep G2细胞系相关产品:SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞 SNU5细胞系相关产品:NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞 KYSE 510细胞系相关产品:NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞 NuTu-19细胞系相关产品:SUP-B15细胞、WI 38细胞、Tb 1-Lu细胞 Hs 742.T细胞系相关产品:High5细胞、H-1435细胞、B16 subline B78细胞 Hs940.T细胞系相关产品:293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞 SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞 GEO细胞系相关产品:NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞 786-0WT细胞系相关产品:PATU-S细胞、BXPC3细胞、TW 01细胞 H-2030细胞系相关产品:OCIAML4细胞、HCC827细胞、H-128细胞 HCC-1419细胞系相关产品:Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞 Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品:PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞 OSC-19细胞系相关产品:BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞 V 79-4细胞系相关产品:FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞 3T3L1细胞系相关产品:CATHa细胞、RKOAS451细胞、HCC-2185细胞 U-343MG细胞系相关产品:NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞 H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 BeWo细胞系相关产品:SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞 MADB106细胞系相关产品:JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞 Hs-281-T细胞系相关产品:NPC-TW01细胞、OVCA432_Bast细胞、HT 1080细胞 MUG-Chor1细胞系相关产品:Mv1.Lu细胞、L细胞、SW 1783细胞 UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞 KOSC-2细胞系相关产品:OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞 B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品:C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞 University of Arizona Cell Culture-893细胞系相关产品:GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞 BxPC-3细胞系相关产品:RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞 Leukemia L1210细胞系相关产品:Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞 HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞 HEK (AD293)细胞系相关产品:WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞 TM-3细胞系相关产品:LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞 RSMC细胞系相关产品:SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞 CLONE M3细胞系相关产品:P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞 MES23.5细胞系相关产品:NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞 EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞 AG 9细胞系相关产品:Ramos-RA1细胞、IAR20细胞、NCIH345细胞 NCI-H847细胞系相关产品:Namalwa细胞、NCI-H-128细胞、IPLB-SF 21AE细胞 NCI-SNU-423细胞系相关产品:CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞 WERI Rb-1细胞系相关产品:LY细胞、SW1116细胞、U-343 MG细胞 HSAS1细胞系相关产品:hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞 GB-1 epithelioid cells人脑胶质母细胞瘤细胞系 5-8F细胞系相关产品:Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 MDA MB 361细胞系相关产品:H3255_DA细胞、LS411N细胞、WIL2S细胞 T2细胞系相关产品:HCC-38细胞、SGC996细胞、SW-954细胞 H295R-S1细胞系相关产品:AU565细胞、SF-126细胞、NHA细胞 "
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