"LIXC002 epithelioid cells人源肝癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
NPC-TW039细胞系相关产品:Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
SKNSH细胞系相关产品:OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞
细胞生长:贴壁
LIXC002 epithelioid cells人源肝癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:3传代,3-4天传1次
CHL细胞系相关产品:Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞
HA1800细胞系相关产品:HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
MLA 144细胞系相关产品:ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
L-132细胞系相关产品:CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
MCF7细胞系相关产品:CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LIXC002 epithelioid cells人源肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮细胞样
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
Cates-1B细胞系相关产品:BHK 21细胞、AAV-293细胞、DC 2.4细胞
SKNDZ细胞系相关产品:751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
HEEpiC细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
GM01232细胞系相关产品:Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞
KM H-2细胞系相关产品:NCI-H1838细胞、Kit 225细胞、AZ521细胞
THP 1细胞系相关产品:HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞
NSH细胞系相关产品:THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
Panc10.05细胞系相关产品:MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
BT549细胞系相关产品:HEC1-A细胞、U343MG细胞、DMS79细胞
RS4;11细胞系相关产品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
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SK-MEL2细胞系相关产品:COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
UPCI-SCC-090细胞系相关产品:U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞
HCCLM3细胞系相关产品:HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞
COR-L51细胞系相关产品:C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞
NCIH1792细胞系相关产品:HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
Adeno-293细胞系相关产品:VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞
LOUNH91细胞系相关产品:CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞
SUM 149细胞系相关产品:Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞
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KYSE-30细胞系相关产品:95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞
Hela-mock细胞系相关产品:LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品:SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
CL1-0细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、NCIADR.RES细胞、PK(15)细胞
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RFL6细胞系相关产品:HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
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OVCAR3细胞系相关产品:BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
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Tj-905细胞系相关产品:GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞
L-M[TK-]细胞系相关产品:FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞
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B-104细胞系相关产品:COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品:Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
BpRcl细胞系相关产品:HTR-8/SV neo细胞、NCI-H508细胞、ARH 77细胞
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RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
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H-2342细胞系相关产品:HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
HOS TE85细胞系相关产品:Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞
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U-251细胞系相关产品:Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
C3H10T1-2细胞系相关产品:V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
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PC9细胞系相关产品:CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品:Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
HCC-4006细胞系相关产品:SNU869细胞、H-841细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞
MC3T3-E1细胞系相关产品:NCIH2228细胞、RAW-264.7细胞、Hs 729T细胞
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HLEpiC细胞系相关产品:Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
LSC-1细胞系相关产品:NCIH1703细胞、GM05862细胞、HEK293E细胞
HET1A细胞系相关产品:COR-L279细胞、Gerner 7666细胞、H2195细胞
hEEC细胞系相关产品:Pa017C细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、TMD-8细胞
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