"NCI-H2087 epithelioid cells人非小细胞肺腺癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞 FRTL 5细胞系相关产品:RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞 CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞 细胞生长:贴壁 NCI-H2087 epithelioid cells人非小细胞肺腺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。 HSAEC1-KT细胞系相关产品:SW-403细胞、Duke University 4475细胞、H-1623细胞 HCC-2185细胞系相关产品:hTERT RPE-1细胞、SU-DHL-8细胞、KYSE140细胞 WERI细胞系相关产品:OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞 NCI-H2009细胞系相关产品:CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞 OCI AML4细胞系相关产品:CCRF细胞、H-1770细胞、T-HEECs细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 NCI-H2087 epithelioid cells人非小细胞肺腺癌细胞系 细胞生长特性:悬浮生长,有少数细胞疏松贴壁 细胞形态特性:上皮样 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 EST50细胞系相关产品:CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞 SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞 EnCa1细胞系相关产品:K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞 SK-SH-SY5Y细胞系相关产品:QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞 NFS-60细胞系相关产品:Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞 WM 2664细胞系相关产品:TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞 OsA-CL细胞系相关产品:TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞 293GP细胞系相关产品:BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞 WEHI231细胞系相关产品:LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞 H920细胞系相关产品:HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞 NCI-H2087 epithelioid cells人非小细胞肺腺癌细胞系 NCI-H146细胞系相关产品:B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞 Jurkat Clone E6-1细胞系相关产品:CNE2Z细胞、D-324MED细胞、RIN-m细胞 MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞 NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞 OEC19细胞系相关产品:TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞 H-2198细胞系相关产品:KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞 KMB17细胞系相关产品:Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞 P3-X63Ag8细胞系相关产品:HCC 2185细胞、Reuber H35细胞、H460细胞 GS9L细胞系相关产品:Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞 ZR-75-1细胞系相关产品:H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞 AC29细胞系相关产品:HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞 COR-L105细胞系相关产品:HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞 H82细胞系相关产品:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞 W133细胞系相关产品:HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞 H-69细胞系相关产品:VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞 HUV-EC-C细胞系相关产品:B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞 BT-549细胞系相关产品:H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞 WM115细胞系相关产品:NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞 SNU16细胞系相关产品:CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞 TM4细胞系相关产品:UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞 T98细胞系相关产品:SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞 KYSE140细胞系相关产品:H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞 PLA801-95D细胞系相关产品:SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞 COLO-394细胞系相关产品:H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞 NHRF细胞系相关产品:D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞 RH-35细胞系相关产品:H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞 RGC-5细胞系相关产品:B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞 MESSADX5细胞系相关产品:MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞 OCI-Ly 10细胞系相关产品:IEC 18细胞、HLE B-3细胞、WILL-2细胞 CAL 12细胞系相关产品:PTK2细胞、HO8910/PM细胞、IPLB-SF 21细胞 KMST6细胞系相关产品:MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞 NIHOVCAR3细胞系相关产品:FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞 ARO81细胞系相关产品:SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞 JHH2细胞系相关产品:DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞 Mono Mac 6细胞系相关产品:CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞 SUM-52PE细胞系相关产品:GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞 EJ-1细胞系相关产品:Functional Liver Cell-7细胞、FHCRC subclone 11细胞、Cor L88细胞 Kato-III细胞系相关产品:Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞 HL-60 clone15细胞系相关产品:MLOY4细胞、Tn-5B1-4细胞、NIH-OVCAR-3细胞 RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞 L2细胞系相关产品:D562细胞、TALL-104细胞、NPC-TW 039细胞 R2C细胞系相关产品:Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞 FF-WT-BJ细胞系相关产品:hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞 Huh-7.5细胞系相关产品:HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞 HBZY 1细胞系相关产品:HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞 RC-4B/C细胞系相关产品:SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞 PC-3M 2B4细胞系相关产品:KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞 RD细胞系相关产品:MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞 HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞 SC细胞系相关产品:DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞 NCI-H69细胞系相关产品:H735细胞、PL 45细胞、MHCC 97-H细胞 NCI-H2087 epithelioid cells人非小细胞肺腺癌细胞系 BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品:OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞 NCIH838细胞系相关产品:MAVER1细胞、MRCV细胞、GC-1细胞 HAEC细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney 21细胞、BC-025细胞、CMT-167细胞 EnCa1细胞系相关产品:K7M2-WT细胞、SUDHL-10细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞 "
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