"CCD-33Co Cell:人结肠成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HREC细胞系相关产品:H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
SNU216细胞系相关产品:MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
BL6细胞系相关产品:UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CCD-33Co Cell:人结肠成纤维细胞系
细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH2110细胞系相关产品:CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品:UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞
D283MED细胞系相关产品:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
CCD-33Co Cell:人结肠成纤维细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
CCD1095Sk细胞系相关产品:NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
THEECs细胞系相关产品:SK-N-BE2细胞、NTC200细胞、L-5178-Y-R细胞
SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
A-172 MG细胞系相关产品:HCC-827细胞、COLO-824细胞、MEC1细胞
CNE细胞系相关产品:JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
NK10a细胞系相关产品:HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
NCI-H2009细胞系相关产品:CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
CCD-33Co Cell:人结肠成纤维细胞系
Nb2a细胞系相关产品:CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
COS-7细胞系相关产品:U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞
IOSE 29细胞系相关产品:293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品:HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
MDA-MB-435S细胞系相关产品:Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞
RINm5F细胞系相关产品:AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞
IHH-4细胞系相关产品:PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞
HuO9细胞系相关产品:SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞
MSTO211H细胞系相关产品:NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
MSTO211H细胞系相关产品:NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
KU-812-F细胞系相关产品:SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
Jeko1细胞系相关产品:Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
DHL-5细胞系相关产品:KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞
H-747细胞系相关产品:HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
Ramos G6.C10细胞系相关产品:SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞
SkChA1细胞系相关产品:REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
MPVECs细胞系相关产品:WM 239A细胞、PL-9细胞、Hs819.T细胞
Hs888Lu细胞系相关产品:COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
G-402细胞系相关产品:FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
SN4741细胞系相关产品:Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
LED-WiDr细胞系相关产品:SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
NCI-H1975细胞系相关产品:LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品:Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
5637细胞系相关产品:2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
ARPE19细胞系相关产品:Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品:hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品:MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
NCI-HUT-292细胞系相关产品:NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞
PK 15细胞系相关产品:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
SNU739细胞系相关产品:CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞
BCP-1细胞系相关产品:P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞
NCI-H1522细胞系相关产品:H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞
HepG2-luc细胞系相关产品:SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
KYSE-140细胞系相关产品:MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞
HemECs细胞系相关产品:Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞
LADMAC细胞系相关产品:TO175T细胞、MRC 5细胞、FHCRC subclone 11细胞
RERF-LCMS细胞系相关产品:NCI-H1882细胞、MAntle cell VERona-1细胞、BLO-11细胞
PLA801D细胞系相关产品:P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
U-138 MG细胞系相关产品:NCIH196细胞、A549/DDP细胞、VMRCRCZ细胞
KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
H35 Reuber细胞系相关产品:CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞
CCD-33Co Cell:人结肠成纤维细胞系
HEC-1B细胞系相关产品:HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
hFOB1.19细胞系相关产品:Helacyton gartleri细胞、IPLB-SF 21细胞、Ramos细胞
WB F344细胞系相关产品:T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品:58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
HEP3B2细胞系相关产品:Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞
H-526细胞系相关产品:HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞
D407细胞系相关产品:NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品:NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
TEV-1细胞系相关产品:4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞
OCI-LY-3细胞系相关产品:MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞
NCI-H-128细胞系相关产品:RPMI 8226/S细胞、NRK-49F细胞、C-127细胞
SU 86.86细胞系相关产品:UWB1.289细胞、Hs683T细胞、HUT28细胞
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