"ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:详见相关文献介绍
MDCK supertube细胞系相关产品:MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞
Y-1细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、Panc4.03细胞、HEC251细胞
GA10细胞系相关产品:H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
AR4-2J细胞系相关产品:Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hs68细胞系相关产品:DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
MRAEC细胞系相关产品:LNCaP C4-2B细胞、LS-123细胞、RAMSCs细胞
P 3 HR 1细胞系相关产品:SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞
MPP 89细胞系相关产品:KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
SNUC1细胞系相关产品:HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞
细胞生长特性:悬浮生长
ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
ECGI10细胞系相关产品:CG4细胞、BDCM细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞
TE3细胞系相关产品:HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品:Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品:NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
Walker256细胞系相关产品:NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
Pro-5 Lec1.3c细胞系相关产品:HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞
MX-1细胞系相关产品:HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞
ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
RBE4细胞系相关产品:B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞
GES1细胞系相关产品:HEK293FT细胞、Hs832.Tc细胞、MG-HU-3细胞
NCIH647细胞系相关产品:Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
COR-L 105细胞系相关产品:CHP212细胞、MDCKII细胞、HCCLM3细胞
CCD 966SK细胞系相关产品:MS 751细胞、DHL8细胞、TGBC11TKB细胞
MC-116细胞系相关产品:SBC3细胞、NPA87-1细胞、H-510细胞
Los Angeles Prostate Cancer-4细胞系相关产品:SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞
NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
JM细胞系相关产品:NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
JM细胞系相关产品:NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
CTSC-3细胞系相关产品:HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
SKNBE-1细胞系相关产品:SKOV-433细胞、BC3H-1细胞、JS1细胞
FTC133细胞系相关产品:HCC1395细胞、HSAS1细胞、HCA 7细胞
NHA细胞系相关产品:MPP-89细胞、CNE细胞、NIE 115细胞
WM2664细胞系相关产品:A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞
VMRCRCZ细胞系相关产品:BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞
SUIT-2细胞系相关产品:K1735细胞、GalK 1细胞、HLCL9B10细胞
PC-3M 2B4细胞系相关产品:KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
NCI-441细胞系相关产品:SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞
NS-I/1细胞系相关产品:3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
COR-L23细胞系相关产品:CF Pac1细胞、J774A1细胞、NFS 60细胞
SPCA1细胞系相关产品:Hep-G2细胞、DHL-5细胞、CCD 966 SK细胞
HeLa/S3细胞系相关产品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
Normal Rat Kidney细胞系相关产品:526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞
CT26细胞系相关产品:H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
MDAMB453细胞系相关产品:MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞
CAL 33细胞系相关产品:HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
HSC2细胞系相关产品:HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
MDAMB175细胞系相关产品:FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
3T3F442A细胞系相关产品:Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
H3396细胞系相关产品:NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
NE1细胞系相关产品:LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞
L929细胞系相关产品:NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
IMCD3细胞系相关产品:P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞
MLOY4细胞系相关产品:PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
RPE-hTERT细胞系相关产品:alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞
NCI-H322细胞系相关产品:CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
IEC-18细胞系相关产品:McA-RH7777细胞、CTV1细胞、Kit 225细胞
HANK-1细胞系相关产品:HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞
OCI-AML4细胞系相关产品:HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞
MEG01细胞系相关产品:OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
BT-549细胞系相关产品:H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞
EVSA/T细胞系相关产品:OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
HLE细胞系相关产品:PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞
MUM2B细胞系相关产品:EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞
WEHI-164细胞系相关产品:HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
NCIH847细胞系相关产品:SUPM2细胞、Pa16C细胞、H23细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品:H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
GM04154B细胞系相关产品:CG-4细胞、HCV-29细胞、SNU-354细胞
L 132细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞
UT-7细胞系相关产品:HCCC-9810细胞、Panc_04_03细胞、FL62891细胞
SL1细胞系相关产品:Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
SK-MEL-5细胞系相关产品:H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
HUC细胞系相关产品:FK81细胞、HuT78细胞、OSK-1细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、T98G细胞、Hs578Bst细胞
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关键字: ANA-1 Cell:小鼠巨噬细胞系
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