"NCI-H2107 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞 NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞 MT-3 [Human leukocytes]细胞系相关产品:PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞 细胞生长:贴壁 NCI-H2107 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:3-4天换液1次。 GEO细胞系相关产品:NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞 KYSE50细胞系相关产品:HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞 Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品:U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞 PaTu 8988s细胞系相关产品:22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞 H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 NCI-H2107 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系 细胞生长特性:悬浮生长 细胞形态特性:上皮细胞 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 SP2-0-Ag14细胞系相关产品:KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞 HO-8910细胞系相关产品:H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞 LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞 ACC2细胞系相关产品:SUDHL-8细胞、GM637细胞、EFO27细胞 H-1694细胞系相关产品:HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞 NPA'87细胞系相关产品:Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞 C4-2 B细胞系相关产品:AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞 JHH7细胞系相关产品:TE354.T细胞、GM03190细胞、WERI-Rb-1细胞 B-95-8细胞系相关产品:L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞 HCC-9724细胞系相关产品:LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞 NCI-H2107 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系 GI-1细胞系相关产品:SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞 NCIH1930细胞系相关产品:Hs888Lu细胞、LLC1细胞、NCI-H676细胞 HB611细胞系相关产品:HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB(HCF)细胞 CII细胞系相关产品:MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞 MC-3T3-E1细胞系相关产品:NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞 MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞 MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞 KGN细胞系相关产品:SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞 NCI-H1404细胞系相关产品:THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞 SCC7细胞系相关产品:Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞 Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞 HEK-AD293细胞系相关产品:KASUMI1细胞、ROS1728细胞、LA-N-5细胞 LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞 MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞 CL40细胞系相关产品:HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞 KMS11细胞系相关产品:B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞 RL-952细胞系相关产品:B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞 JHH-7细胞系相关产品:GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞 B16/F1细胞系相关产品:H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞 B16/F1细胞系相关产品:H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞 H69C细胞系相关产品:H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞 32D-Cl3细胞系相关产品:FT-293细胞、Co 115细胞、H1581细胞 MB 157细胞系相关产品:UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞 H460细胞系相关产品:Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞 HFF1细胞系相关产品:BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞 MADB 106细胞系相关产品:HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞 AAV293细胞系相关产品:COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞 TGW细胞系相关产品:Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞 Hs852T细胞系相关产品:UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞 TO 175.T细胞系相关产品:RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞 H2170细胞系相关产品:MBdSMC细胞、IM95细胞、MADB 106细胞 D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞 MAEC细胞系相关产品:NCIH820细胞、TF1细胞、RBL细胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品:OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞 SF539细胞系相关产品:K562细胞、SJ-Rh 30细胞、3T3NIH细胞 Co-115细胞系相关产品:RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞 SHI-1细胞系相关产品:T24(ECV304)细胞、C32r细胞、A 172细胞 Hs 863.T细胞系相关产品:CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞 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