"OVISE epithelioid cells人卵巢癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。 LA 4细胞系相关产品:T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞 CAL-33细胞系相关产品:COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞 IGROV细胞系相关产品:HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞 细胞生长:贴壁 OVISE epithelioid cells人卵巢癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:5 x 10^4 cells/ml SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞 K299细胞系相关产品:CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞 NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞 IGROV细胞系相关产品:HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞 CAL-12T细胞系相关产品:BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 OVISE epithelioid cells人卵巢癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞 常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 U2OS细胞系相关产品:Hela-Ap-1细胞、BIU-87细胞、KLN-205细胞 NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞 VMRCRCZ细胞系相关产品:BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞 67NR细胞系相关产品:Hs839T细胞、H2195细胞、LLCMK2细胞 MCF-7/ADR细胞系相关产品:CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞 CEM-C1细胞系相关产品:Reuber H35细胞、AG06814-J细胞、Hs 729细胞 JCA-1细胞系相关产品:NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞 B-16细胞系相关产品:SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞 MDAMB361细胞系相关产品:HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞 SK MEL-28细胞系相关产品:Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞 OVISE epithelioid cells人卵巢癌细胞系 Centre Antoine Lacassagne-33细胞系相关产品:Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞 NCIH660细胞系相关产品:UCLA-SO-14细胞、UM-RC-2细胞、KAT5细胞 UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞 GC-1 spg细胞系相关产品:NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞 231-luc细胞系相关产品:BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞 GB-1细胞系相关产品:DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞 SMC-1细胞系相关产品:GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞 HTori-3细胞系相关产品:LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞 NG10815细胞系相关产品:P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞 WB-F344细胞系相关产品:NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞 SKMel-5细胞系相关产品:WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品:HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞 RCC10细胞系相关产品:LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞 NGEC细胞系相关产品:Duke University 145细胞、TCam-2细胞、SF-763细胞 TF1细胞系相关产品:NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞 Reuber H35细胞系相关产品:TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞 NR 8383细胞系相关产品:RH-30细胞、SF 539细胞、PLC8024细胞 NCI-H378细胞系相关产品:WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞 PECAPJ34细胞系相关产品:BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞 NCI-H69C细胞系相关产品:SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞 CAKI1细胞系相关产品:Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞 MCF7细胞系相关产品:CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞 IMR90细胞系相关产品:Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞 BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞 MHCC97L细胞系相关产品:MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞 Strain KB细胞系相关产品:6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞 2PK-3细胞系相关产品:OC-3-VGH细胞、MLA 144细胞、A 2780 CP细胞 RCC-4细胞系相关产品:A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞 HHL5细胞系相关产品:NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞 SCC-7细胞系相关产品:NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞 OSA细胞系相关产品:SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞 WM-239A细胞系相关产品:KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞 OCI Ly3细胞系相关产品:Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞 MC 116细胞系相关产品:GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞 H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 Human ErythroLeukemia细胞系相关产品:EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞 BEL-7405细胞系相关产品:H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞 Hs934T细胞系相关产品:Kit-225-K6细胞、hRPTC细胞、HEK293F细胞 MDCK.2细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞 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