"HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品:LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞 MV-3细胞系相关产品:H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞 Ketr-3细胞系相关产品:C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞 细胞生长:贴壁 HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:2传代 SK-LMS-1细胞系相关产品:HNE1细胞、MDCC-MSB-1细胞、NCI-SNU-1细胞 Mono-Mac-1细胞系相关产品:ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞 CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞 CNE2细胞系相关产品:WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞 GM17219细胞系相关产品:SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:详见细胞说明书 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞 Wien133细胞系相关产品:CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞 SNU398细胞系相关产品:G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞 AU565细胞系相关产品:BV2细胞、COLO-741细胞、RL-952细胞 CAKI 2细胞系相关产品:RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞 U-251MG细胞系相关产品:SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞 JROECL 33细胞系相关产品:HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞 RT112细胞系相关产品:RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞 KE-37细胞系相关产品:KE39细胞、6-T CEM细胞、HM1900细胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品:Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞 HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌细胞系 RetroPack PT67细胞系相关产品:MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞 GM03569B细胞系相关产品:NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞 Hs839T细胞系相关产品:U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞 BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞 C518细胞系相关产品:MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞 P-3J细胞系相关产品:TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞 KYSE410细胞系相关产品:PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞 NK-92.05细胞系相关产品:32D-Cl3细胞、H1573细胞、NCI-H146细胞 TE-85细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞 H1954细胞系相关产品:Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞 MCA 38细胞系相关产品:MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞 B10BR细胞系相关产品:NCI-H838细胞、OVCA5细胞、IPEC-1细胞 NCI-H2452细胞系相关产品:SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞 HR8348细胞系相关产品:DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞 MeT-5A细胞系相关产品:A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞 NCI-H1666细胞系相关产品:Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞 RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞 NCI-H2347细胞系相关产品:KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞 NCI-H596细胞系相关产品:MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞 AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞 DanG细胞系相关产品:207细胞、TGW细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞 LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞 MDA-MB-435-S细胞系相关产品:Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞 Hs68细胞系相关产品:DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞 P3/NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞 HCV 29细胞系相关产品:Ly19细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、OSRC2细胞 RERFLCMS细胞系相关产品:DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞 NCIH1581细胞系相关产品:H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞 Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品:NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞 SVEC 4-10细胞系相关产品:H-711细胞、RMG-1细胞、GLC-82细胞 EA.hy 926细胞系相关产品:RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞 BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞 Beta-TC-6细胞系相关产品:HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞 H-82细胞系相关产品:NCIH295R细胞、HEL 299细胞、PG-BE1细胞 L cell细胞系相关产品:C38细胞、CHO-K1细胞、Hep-G2细胞 CD18细胞系相关产品:LUDLU 1细胞、MARC-145细胞、HCC0827细胞 H-2228细胞系相关产品:VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞 MC26细胞系相关产品:Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞 bEND.3细胞系相关产品:ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞 Anglne细胞系相关产品:COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞 Hs611T细胞系相关产品:B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞 CAL85-1细胞系相关产品:COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞 MRC9细胞系相关产品:HLEB-3细胞、NCI-H226细胞、NCIH510细胞 SW48细胞系相关产品:NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞 UMNSAH-DF-1细胞系相关产品:U343MG细胞、WM115mel细胞、VAESBJ细胞 HFL细胞系相关产品:HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞 Psi-2-DAP细胞系相关产品:EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞 Pt K1细胞系相关产品:Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞 NCI-522细胞系相关产品:SR细胞、He La细胞、TE14细胞 HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞 BGC823细胞系相关产品:KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞 HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌细胞系 HAEC细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞 Ect1/E6E7细胞系相关产品:NIH-3T3-L1细胞、MEL-526细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞 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