MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
中文名称:MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称:MTT cell proliferation and Cytotoxicity Detection Kit
产品规格:500T|1000T
MTT 分析法以代谢还原噻唑蓝3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP 相关的脱氢酶,可将黄色的MTT 还原为不溶性的蓝紫色的甲月赞(Formazan),死细胞此酶消失,MTT 不被还原。用DMSO 溶解Formazan 后可用酶标仪在550nm 波长处检测光密度。 操作方法1.在96 孔板加入细胞100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。4.将5×MTT 用Dilution Buffer 稀释成1× MTT。5.每孔加50μL 1× MTT,在37℃孵育4 小时,使MTT 还原为甲臜。6.吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲月赞溶解,用平板摇床摇匀。7.酶标仪在550nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 波长,于490nm 波长处检测亦可)。 结果分析 1. 细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。凯
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