"MDCK-II epithelioid cells犬肾细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。 HBE135-E6E7细胞系相关产品:WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞 H1688细胞系相关产品:T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞 2BS细胞系相关产品:alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞 细胞生长:贴壁 MDCK-II epithelioid cells犬肾细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:1:3传代,3-4天传1次 A3细胞系相关产品:SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞 KM12SM细胞系相关产品:OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞 SKNF1细胞系相关产品:HAC-84细胞、SNU638细胞、AtT-20细胞 Dami细胞系相关产品:H-1954细胞、SK-NMC细胞、U-138MG细胞 KYSE50细胞系相关产品:HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 MDCK-II epithelioid cells犬肾细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮样 为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。 HEK 293T/17细胞系相关产品:SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞 746T细胞系相关产品:MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞 HCC-1806细胞系相关产品:D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞 MOLT-4细胞系相关产品:HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞 OS-RC-2细胞系相关产品:NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞 MODE-K细胞系相关产品:RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞 OLN-93细胞系相关产品:SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞 CoCL2细胞系相关产品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞 Walker-256细胞系相关产品:AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞 HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞 MDCK-II epithelioid cells犬肾细胞系 Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品:PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞 A375细胞系相关产品:LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞 LL/2 (LLC1)细胞系相关产品:HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞 BGC823细胞系相关产品:KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞 HTori 3细胞系相关产品:P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞 NCIH1793细胞系相关产品:D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞 NCI-H2009细胞系相关产品:CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞 SNU423细胞系相关产品:OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞 HT29细胞系相关产品:SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞 293 HEK细胞系相关产品:FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞 138 MG细胞系相关产品:HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞 D341Med细胞系相关产品:NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞 PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞 HCT 15细胞系相关产品:COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞 PLC/PRF5细胞系相关产品:KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞 A9(Hamprecht)细胞系相关产品:SCC-15细胞、HCC-1359细胞、PC-14细胞 H-1355细胞系相关产品:CCC-HIE-2细胞、BERH-2细胞、UCLA NPA871细胞 SKN-SH细胞系相关产品:Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞 Jurkat FHCRC细胞系相关产品:SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞 130-T细胞系相关产品:G361-mel细胞、Pt-K2细胞、SUM 159PT细胞 Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品:INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞 VMM-5A细胞系相关产品:CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞 F442A细胞系相关产品:TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞 Ly8细胞系相关产品:Vx-2细胞、LU451细胞、CWR22-Rv1细胞 SHG-44细胞系相关产品:H4细胞、A253细胞、SF295细胞 COV434细胞系相关产品:SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞 H-2122细胞系相关产品:SF126细胞、MDA231-LM2-4175细胞、TF1细胞 COR-L23/P细胞系相关产品:RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞 SUM149-PT细胞系相关产品:MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞 MSCs(mUCMSCs)细胞系相关产品:NCIH64细胞、NIH:OVCAR4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞 HPMC细胞系相关产品:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞 IEC6细胞系相关产品:HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞 GM17219细胞系相关产品:SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 EoL-1-cell细胞系相关产品:BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞 SNU119细胞系相关产品:MDA1386细胞、MUTZ-3细胞、CL1-0细胞 MAVER1细胞系相关产品:SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞 MDA-MB-468细胞系相关产品:V79-4细胞、H82细胞、Ra No. 1细胞 SK-MES1细胞系相关产品:G519细胞、MCF7-CTRL细胞、MB468细胞 NMCG1细胞系相关产品:HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞 VK2细胞系相关产品:COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞 CCC-ESF-1细胞系相关产品:H1781细胞、Namalwa细胞、MB231细胞 SK-ChA-1细胞系相关产品:CHL细胞、PC-3细胞、TOV-112D细胞 AsPC-1细胞系相关产品:MCF12A细胞、HCT-8/V细胞、LSECs细胞 OVCAR-8/ADR细胞系相关产品:Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞 HO-8910 PM细胞系相关产品:CL-40细胞、H-2227细胞、NCI-H345细胞 CHP 126细胞系相关产品:H-23细胞、OVCAR.3细胞、Cates-1B细胞 SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞 C4I细胞系相关产品:V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞 LA-N-6(OAN)细胞系相关产品:Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞 MGc80-3细胞系相关产品:Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞 SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞 MDCK-II epithelioid cells犬肾细胞系 WEHI-164细胞系相关产品:HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞 SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、Hs611T细胞、Vero 76 clone E-6细胞 C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品:Ramos(RA1)细胞、Hs 281.T细胞、NCI H929细胞 HCC-15细胞系相关产品:MRMT-1细胞、ACC2细胞、LAN-6细胞 "
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