MPP 89 epithelioid cells间皮瘤细胞系

"MPP 89 epithelioid cells间皮瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
HPAF-II/CD18细胞系相关产品：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞
SHEP1细胞系相关产品：SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品：LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
细胞生长：贴壁
MPP 89 epithelioid cells间皮瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MTEC1细胞系相关产品：HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
MCF-12F细胞系相关产品：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品：NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
AG 9细胞系相关产品：Ramos-RA1细胞、IAR20细胞、NCIH345细胞
SKMEL-31细胞系相关产品：NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MPP 89 epithelioid cells间皮瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
TSCC1细胞系相关产品：SW-756细胞、M4e细胞、HuP-T4细胞
190PT细胞系相关产品：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
CF PAC-1细胞系相关产品：WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞
H2444细胞系相关产品：H1437细胞、NCI-H1568细胞、SW 48细胞
NCI522细胞系相关产品：MDA-kb2细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、OCI-LY-19细胞
C-8161细胞系相关产品：PLB-985细胞、BS-C-1细胞、SNU-423细胞
TE-4细胞系相关产品：GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
Balb/3T3-4-Cl31细胞系相关产品：PL-5细胞、Tb1.Lu细胞、CHG5细胞
Colon-26细胞系相关产品：LN 382细胞、PM6细胞、COLO 357细胞
MPP 89 epithelioid cells间皮瘤细胞系
NG10815细胞系相关产品：P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞
HGF-1细胞系相关产品：PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞
SCL-2细胞系相关产品：BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
SKOV-3细胞系相关产品：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞
SKOV-3细胞系相关产品：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞
HN4细胞系相关产品：LA4细胞、MDA361细胞、H-1618细胞
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞
WM266细胞系相关产品：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
SK-ES-1细胞系相关产品：CD18/HPAF细胞、GCT细胞、N87细胞
A7r5细胞系相关产品：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
H1693细胞系相关产品：PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
130T细胞系相关产品：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞
RetroPack PT67细胞系相关产品：MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
HcerEpic细胞系相关产品：H-596细胞、Hepa1-6细胞、hUC-MSC细胞
Rat Lung-65细胞系相关产品：M-07e细胞、OCI Ly3细胞、Mv.1.Lu细胞
MESSA Dx5细胞系相关产品：PASMCS细胞、CCD19-Lu细胞、U251细胞
TNC-1B12B4细胞系相关产品：Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品：NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
SKN-SH细胞系相关产品：Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
H9c2细胞系相关产品：DU_145细胞、HOS(TE85)细胞、FOX-NY细胞
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
TSCC1细胞系相关产品：SW-756细胞、M4e细胞、HuP-T4细胞
NCI-ADR-RES细胞系相关产品：Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞
293c18细胞系相关产品：NCIH23细胞、UO31细胞、BC-023细胞
Gerner 7666细胞系相关产品：Hs 821.T细胞、RT 112细胞、HEK 293A细胞
P30/OHK细胞系相关产品：WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞
AN3-CA细胞系相关产品：UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
NCIH2106细胞系相关产品：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
LS411N细胞系相关产品：H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
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OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
MIN-6细胞系相关产品：SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
HT 29细胞系相关产品：TM4细胞、G361-mel细胞、SRA01/04 (HLE)细胞
OCUM-1细胞系相关产品：MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞
SK-ChA-1细胞系相关产品：CHL细胞、PC-3细胞、TOV-112D细胞
OCIAML5细胞系相关产品：Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞
Hs 274.T细胞系相关产品：KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞
OKT 3细胞系相关产品：SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
S37细胞系相关产品：HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞
LAPC4细胞系相关产品：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
WM35细胞系相关产品：A-172细胞、293F细胞、H-2286细胞
MDCKII-WT细胞系相关产品：MMAc-SF细胞、HRGEC细胞、JVM2细胞
BC-025细胞系相关产品：Ramos G6.C10细胞、Human Microglia Clone 3细胞、NCI-H748细胞
SW-1573细胞系相关产品：MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
SW 1353细胞系相关产品：Hs 729.T细胞、WM266-4细胞、alphaTC clone 6细胞
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
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WPMY1细胞系相关产品：TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞
H-2110细胞系相关产品：RCC 786-O细胞、FT-293细胞、HCC-202细胞
MUG-Chor1细胞系相关产品：Mv1.Lu细胞、OCI Ly3细胞、EBC1细胞
CF PAC-1细胞系相关产品：WSU-DLCL(2)细胞、SK Hep1细胞、NCI-H295细胞
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