COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系

"COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
P3X63Ag8.653细胞系相关产品：SW 48细胞、CMT-167细胞、Beta-TC-6细胞
细胞生长：贴壁
COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２传代
MDA231细胞系相关产品：JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
P3 88 D1细胞系相关产品：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
DV-90细胞系相关产品：Eca-109细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞、Duck embryo细胞
PCI-4M细胞系相关产品：hTERT RPE1细胞、52PE细胞、WM451Lu细胞
JeKo 1细胞系相关产品：HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：详见细胞说明书
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
H209细胞系相关产品：HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞
CCD1112Sk细胞系相关产品：NB1RGB细胞、BL6细胞、MV-4:11细胞
U 937细胞系相关产品：EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品：1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
KNS42细胞系相关产品：MV4II细胞、HCC0095细胞、NCI-H526细胞
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞
MG63细胞系相关产品：SW 1271细胞、VP 229细胞、SW 13细胞
BOWES细胞系相关产品：T 24细胞、MDA 435细胞、3T3-A31细胞
RK13细胞系相关产品：CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
GM 637细胞系相关产品：TALL 1细胞、MV-1-Lu细胞、HCT15细胞
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
SNU5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞
FDC-P1细胞系相关产品：CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
CNE细胞系相关产品：JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
MSC细胞系相关产品：CALU1细胞、GT38细胞、ARPE-19细胞
MSC细胞系相关产品：CALU1细胞、GT38细胞、ARPE-19细胞
LC2/Ad细胞系相关产品：RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
SK.OV.3细胞系相关产品：HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
293/EBNA-1细胞系相关产品：SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
NCI-H2170细胞系相关产品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
HFF细胞系相关产品：MAEC细胞、HuH 6细胞、P3.653细胞
HEEpiC细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
RIN-m5F细胞系相关产品：NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
Hs 274.T细胞系相关产品：KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞
JJN-3细胞系相关产品：HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
Wistar Institute-38细胞系相关产品：PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
LAN6细胞系相关产品：TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞
LAN6细胞系相关产品：TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
Clone M-3细胞系相关产品：MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品：HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
CBRH-7919细胞系相关产品：MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
DHL-5细胞系相关产品：KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
HEK-293A细胞系相关产品：ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞
RERFLCMS细胞系相关产品：DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞
GI-1细胞系相关产品：SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞
PC-3M-IE8细胞系相关产品：MDA-MB-231-GFP细胞、M059J细胞、CCK-81细胞
P388细胞系相关产品：KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞
CT-26细胞系相关产品：Immortal Pig Intestinal-2I细胞、Hs-606-T细胞、A2780/Taxol细胞
SNU-423细胞系相关产品：CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞
BMF细胞系相关产品：TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
Colon26细胞系相关产品：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
Colon26细胞系相关产品：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
TE8细胞系相关产品：RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞
H-520细胞系相关产品：QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞
526mel细胞系相关产品：MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
Ly7细胞系相关产品：CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
HuCCT-1细胞系相关产品：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
95-D细胞系相关产品：Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
293-FT细胞系相关产品：P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞
624mel细胞系相关产品：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
H-441细胞系相关产品：769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞
Hs-578Bst细胞系相关产品：MN 60细胞、P3-Jiyoye细胞、UMR-106细胞
COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
CoCL3细胞系相关产品：H1355细胞、H2228细胞、T-ALL1细胞
SUDHL1细胞系相关产品：GC-1 spg细胞、NCI-H1915细胞、SNU739细胞
MEG01细胞系相关产品：OVCAR4细胞、NCTC-3960细胞、32D:cl3细胞
U 937细胞系相关产品：EAHY-926细胞、H-2023细胞、HEK-AD293细胞
"