"ID8 epithelioid cells小鼠卵巢癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 PC-3M-1E8细胞系相关产品:OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞 SU.86.86细胞系相关产品:D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞 OVCAR 420细胞系相关产品:Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞 细胞生长:贴壁 ID8 epithelioid cells小鼠卵巢癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。 细胞传代方法:1:2传代 CFSC-2G细胞系相关产品:H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞 FHCRC subclone 11细胞系相关产品:3T3细胞、OCM-1A细胞、ARO81细胞 bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品:H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞 V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞 CATHa细胞系相关产品:KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 ID8 epithelioid cells小鼠卵巢癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:详见细胞说明书 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 PC-9细胞系相关产品:CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞 BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞 PC3M-1E8细胞系相关产品:CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞 NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞 H1734细胞系相关产品:H-250细胞、211H细胞、BE2C细胞 OVCAR 4细胞系相关产品:TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞 COR-L26细胞系相关产品:EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞 JIMT1细胞系相关产品:SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞 COLO 357细胞系相关产品:MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞 NW-38细胞系相关产品:Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞 ID8 epithelioid cells小鼠卵巢癌细胞系 P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品:IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞 OV 2008细胞系相关产品:FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞 OsA-CL细胞系相关产品:TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞 SU-DHL-4细胞系相关产品:NCI-522细胞、SW 579细胞、NIHOVCAR3细胞 SW 954细胞系相关产品:A375-S2细胞、Mel526细胞、SUIT 2细胞 NG 108-15细胞系相关产品:GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞 NG 108-15细胞系相关产品:GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞 HCC-1500细胞系相关产品:SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞 16HBEo-细胞系相关产品:NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞 H-1155细胞系相关产品:143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞 OCI-LY-18细胞系相关产品:ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞 211H细胞系相关产品:Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞 KPL-1细胞系相关产品:GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞 Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞 H-1963细胞系相关产品:CTX TNA2细胞、OCI-AML-4细胞、SK-MEL24细胞 CHL-IU细胞系相关产品:KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞 CAL 85-1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞 SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞 RS411细胞系相关产品:NT2-D1细胞、LAN-5细胞、HEK293-FT细胞 VMM5A细胞系相关产品:CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞 U118MG细胞系相关产品:NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞 SCL-1细胞系相关产品:MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞 RCC23细胞系相关产品:L 929细胞、BHK-21细胞、HCC-1438细胞 HNE1细胞系相关产品:RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞 N-2a细胞系相关产品:SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞 J111细胞系相关产品:NCIH650细胞、Hs819T细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞 NCI-H526细胞系相关产品:P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞 MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品:LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞 H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞 NS1-Ag4细胞系相关产品:NCI-H2196细胞、OCI-Ly 3细胞、SW-626细胞 b.End3细胞系相关产品:Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞 ARO-81细胞系相关产品:CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞 Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品:Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞 MHCC-97细胞系相关产品:U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞 CAL62细胞系相关产品:H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞 GT39细胞系相关产品:NCI.H460细胞、RPMI8226细胞、HCC1588细胞 SKLU-1细胞系相关产品:SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞 WILL2细胞系相关产品:H-128细胞、CORL279细胞、OVCAR-4细胞 WILL2细胞系相关产品:H-128细胞、CORL279细胞、OVCAR-4细胞 143 B细胞系相关产品:NCI-SNU-407细胞、ARO-81细胞、SKM-1细胞 OCI-AML-5细胞系相关产品:SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞 NCI-H460细胞系相关产品:SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞 BNL CL.2细胞系相关产品:TF1细胞、JURKAT E-6.1细胞、Colo-206F细胞 OVCA 433细胞系相关产品:Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞 SCC-15细胞系相关产品:MKN 28细胞、SK-MEL-1细胞、OB2细胞 H735细胞系相关产品:Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞 Lec1细胞系相关产品:ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞 ECC-10细胞系相关产品:LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞 MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品:EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞 SPC-A-1细胞系相关产品:CEM.C1细胞、BC-024细胞、751细胞 EL-4细胞系相关产品:NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞 ID8 epithelioid cells小鼠卵巢癌细胞系 IMR-32细胞系相关产品:BpRcl细胞、SKNF1细胞、Hs729T细胞 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