"MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌细胞系 细胞背景资料:MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III级)。 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 H-2227细胞系相关产品:HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞 TK10细胞系相关产品:KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞 Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞 细胞生长:贴壁 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:1:2传代 KNS42细胞系相关产品:MV4II细胞、HCC0095细胞、NCI-H526细胞 SW-954细胞系相关产品:HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞 Hs604T细胞系相关产品:TSCCa细胞、P3X63细胞、GA-10 clone 4细胞 LUDLU 1细胞系相关产品:HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞 U373-MG细胞系相关产品:Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:详见细胞说明书 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 HCC-1954BL细胞系相关产品:Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞 Hs821T细胞系相关产品:ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞 NCTC 929细胞系相关产品:Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞 NCI-H1522细胞系相关产品:H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞 PIEC细胞系相关产品:SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞 T-ALL 1细胞系相关产品:ZR75-30细胞、NUGC-3细胞、OCI-Ly 19细胞 NR 8383细胞系相关产品:RH-30细胞、SF 539细胞、PLC8024细胞 RCSMC细胞系相关产品:OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞 HMrSV5细胞系相关产品:CL11细胞、NCIH1437细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞 OCI-LY-3细胞系相关产品:MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌细胞系 A-704细胞系相关产品:CEM C7细胞、HCV29细胞、NCI-H676B细胞 SKG3A细胞系相关产品:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞 NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞 H1404细胞系相关产品:He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞 COLO 680N细胞系相关产品:SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞 Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞 Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞 NCI-SNU-601细胞系相关产品:U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞 SACC-83细胞系相关产品:LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞 CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞 MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞 Rat-2细胞系相关产品:KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞 Hs675T细胞系相关产品:A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞 RA 1细胞系相关产品:NCTC 1469细胞、A549 ATCC细胞、A-704细胞 HCC-202细胞系相关产品:RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞 OVCAR3细胞系相关产品:BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞 COLO394细胞系相关产品:373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞 CAMA细胞系相关产品:CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞 HepG2/C3A细胞系相关产品:SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞 LU65细胞系相关产品:130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞 U251细胞系相关产品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞 OVCA 433细胞系相关产品:Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞 KMST-6细胞系相关产品:DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞 EAhy926细胞系相关产品:Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞 MH7A细胞系相关产品:HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞 NOR-10细胞系相关产品:ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞 MILE SVEN 1细胞系相关产品:AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞 H1435细胞系相关产品:Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞 F9细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞 Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞 HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品:N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞 BAEC细胞系相关产品:C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞 MLE 12细胞系相关产品:MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞 OCI AML3细胞系相关产品:SW 839细胞、MOLP-8细胞、OVISE细胞 NCI-H1092细胞系相关产品:RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞 143BTK-细胞系相关产品:H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞 HPDE6c7细胞系相关产品:B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞 CFPAC细胞系相关产品:NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞 MyLa 2059细胞系相关产品:B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞 PC-3M-2B4细胞系相关产品:GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞 HS766T细胞系相关产品:CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞 SO-RB50细胞系相关产品:U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞 Panc-05.04细胞系相关产品:SW 1353细胞、WEHI164细胞、EVSA/T细胞 RGC-6细胞系相关产品:RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞 Liver-02细胞系相关产品:MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞 KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞 Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞 RPMI 1788细胞系相关产品:Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞 JVM-3细胞系相关产品:KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞 T-ALL-1细胞系相关产品:NCI-H716细胞、NCIH2342细胞、ReNcell CX细胞 ECV细胞系相关产品:S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌细胞系 NW-38细胞系相关产品:Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞 LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、H548细胞、OV433细胞 CAKI.1细胞系相关产品:SK-ChA1细胞、RCSMC细胞、DV-90细胞 NCTC 929细胞系相关产品:Panc02.03细胞、AM细胞、HTR8/SVneo细胞 "
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