MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系

"MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系
细胞背景资料：该细胞是从克隆的但是表型各异的MC３T３-E１细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC３T３亚克隆４（ATCC CRL-２５９３）和MC３T３亚克隆１４（ATCC CRL-２５９４）在抗坏血酸和３到４mM无机盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们１０天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC３T３亚克隆２４（ATCC CRL-２５９４）和MC３T３亚克隆３０（ATCC CRL-２５９６）在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
YTMLC-90细胞系相关产品：ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞
MOLP2细胞系相关产品：MDA231细胞、Panc2.03细胞、PTK1细胞
X63-Ag8.653细胞系相关产品：LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
细胞生长：贴壁
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MKN45细胞系相关产品：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
SW 756细胞系相关产品：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品：Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
SNB-19细胞系相关产品：LP1细胞、CCD18细胞、SKOV3细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：成纤维细胞样
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
H-1385细胞系相关产品：WIL2 Secreting细胞、H125细胞、Bat lung细胞
RPMI-1788细胞系相关产品：NCIH1693细胞、LK2细胞、SCC-1395细胞
Hs-343-T细胞系相关产品：FL83B细胞、RCK-8细胞、HCT FET细胞
H-1770细胞系相关产品：RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞
5637细胞系相关产品：2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
HMC细胞系相关产品：CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞系相关产品：NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
Earle's L cells细胞系相关产品：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
WM266mel细胞系相关产品：Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞
HMSC细胞系相关产品：A2780CP细胞、SNU-387细胞、KU.812细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系
T98细胞系相关产品：SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
769P细胞系相关产品：AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
293-EBNA1细胞系相关产品：NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞
T24(ECV304)细胞系相关产品：Porcine Kidney-15细胞、Panc 3.27细胞、DI TNC-1细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
COLO-394细胞系相关产品：H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞
SVG p12细胞系相关产品：NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
HT1197细胞系相关产品：190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞
B-CPAP细胞系相关产品：MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞
RBL 1细胞系相关产品：DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
AZ521细胞系相关产品：3T6 Swiss Albino细胞、X63Ag8-653细胞、Uhth-74细胞
C 6细胞系相关产品：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞
IHHA-1细胞系相关产品：G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
OVCA433细胞系相关产品：EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞
NCI-H1623细胞系相关产品：COLO 320HSR细胞、HHUA细胞、ST486细胞
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
U 138 MG细胞系相关产品：A375-MEL细胞、R-1059-D细胞、32D-Cl3细胞
HCC38细胞系相关产品：NCI-H2171细胞、Hs 766.T细胞、MGC803细胞
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞
McA-RH 7777细胞系相关产品：H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞
CMT-93细胞系相关产品：Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
MRASMC细胞系相关产品：Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞
MC116细胞系相关产品：Hs839.T细胞、SCaBER细胞、IHHA-1细胞
C4-2细胞系相关产品：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
WERI-Rb 1细胞系相关产品：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
HT-22细胞系相关产品：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品：L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
H35 Reuber细胞系相关产品：CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞
IEC 6细胞系相关产品：NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
SP-2/0-AG14细胞系相关产品：LAD2细胞、MN60细胞、KP-N-NS细胞
JB6Cl30细胞系相关产品：MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
HCC1359细胞系相关产品：SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
L78细胞系相关产品：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
KYSE140细胞系相关产品：H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞
BA/F3细胞系相关产品：DSL-6A-C1细胞、HEP-3B2细胞、MDA-MB468细胞
SKOV3细胞系相关产品：MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞
LLC-MK2细胞系相关产品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
OVCAR-3细胞系相关产品：TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞
mIMCD-3细胞系相关产品：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
NR8383.1细胞系相关产品：NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞
SUM149PT细胞系相关产品：HCC1954细胞、hTERT RPE1细胞、HEK293-F细胞
NCIH1781细胞系相关产品：Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
Caco-2细胞系相关产品：M-1 myeloid leukemia细胞、HLF细胞、J774细胞
WEHI 164 TC细胞系相关产品：Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞
SCC-7细胞系相关产品：NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠颅顶前骨细胞系
MXI细胞系相关产品：Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、CEMC7细胞、OV2008细胞
TCCSUP细胞系相关产品：DiFi细胞、TOV21G细胞、UMNSAH/DF#1细胞
Hs343T细胞系相关产品：Colon 26细胞、HeLa-S3细胞、NCI-H1668细胞
"