NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系

"NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系
细胞背景资料：１９５２年建系，源于正常C３H/An小鼠的肝脏组织，表达H-２K抗原,鼠痘病毒阴性。
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
hTERT-HPNE细胞系相关产品：OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞
H8细胞系相关产品：SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
U138细胞系相关产品：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
细胞生长：贴壁
NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
H719细胞系相关产品：CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞
CFSC-8B细胞系相关产品：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
HFTF细胞系相关产品：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
HS-695T细胞系相关产品：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：淋巴母细胞
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品：BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
Hce8693细胞系相关产品：UPCI-SCC-154细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞、CMT-167细胞
H1703细胞系相关产品：DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
FHL 124细胞系相关产品：38C13细胞、L-M[TK-]细胞、FRO 81-2细胞
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F81细胞系相关产品：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
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NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系
NMC-G1细胞系相关产品：MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞
Centre Antoine Lacassagne-33细胞系相关产品：Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
Neuro 2a细胞系相关产品：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞
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JB 6细胞系相关产品：H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
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RAW-264.7细胞系相关产品：HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
KM12-SM细胞系相关产品：143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞
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Renal Carcinoma细胞系相关产品：LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
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H1770细胞系相关产品：H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞
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Hs-281-T细胞系相关产品：NPC-TW01细胞、OVCA432_Bast细胞、HT 1080细胞
NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝细胞系
OCI AML2细胞系相关产品：MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
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