人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa检测试剂盒实验步骤具有高效、灵敏、特异的抗体;稳定的重复性和可靠性;吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型等特点。
1(BLC-1/CXCL13)elisa检测试剂盒实验步骤: 1. 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。人巨噬细胞趋化因子(MCF) 每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,37℃温育60分钟。 2. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 3.人巨噬细胞趋化因子(MCF) 每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。 4.取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 5.人巨噬细胞趋化因子(MCF) 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 6.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,人巨噬细胞趋化因子(MCF) 再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa检测试剂盒操作注意事项: 1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 7.加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
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