OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系

"OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系
细胞背景资料：骨髓基质；C５７BL/６ x C３H
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
LC2/Ad细胞系相关产品：RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品：P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
细胞生长：贴壁
OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BNL.CL2细胞系相关产品：TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
Hs 706.T细胞系相关产品：NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞
SW-1573细胞系相关产品：MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
BHP-10细胞系相关产品：SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
PCI:SG231细胞系相关产品：NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
MGSMC细胞系相关产品：WM 115细胞、Hs675细胞、16HBE14o-细胞
PNT1/A细胞系相关产品：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
HCC-2279细胞系相关产品：HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
MSTO-211细胞系相关产品：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞
COLO 205细胞系相关产品：H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
Tb1.Lu细胞系相关产品：CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
SK Col 1细胞系相关产品：KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系
NCIH292细胞系相关产品：HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
BT483细胞系相关产品：SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品：SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品：WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
A-375SM细胞系相关产品：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
HT144-mel细胞系相关产品：MDA MB 436细胞、C6细胞、IHH细胞
U937细胞系相关产品：Kasumi-6细胞、Rat Lung-65细胞、SF 126细胞
SK-Mel1细胞系相关产品：PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞
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TJ905细胞系相关产品：CCC-HEL-1细胞、SNU-407细胞、Pa017C细胞
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H-661细胞系相关产品：PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
8226/S细胞系相关产品：LCD细胞、HCC-4006细胞、293细胞
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NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
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CD18/HPAF细胞系相关产品：NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
JS1细胞系相关产品：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞
P3/X63/Ag8细胞系相关产品：NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
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TE15细胞系相关产品：N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
WSUDLCL2细胞系相关产品：CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞
MEC1细胞系相关产品：J 111细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、SK Col 1细胞
TE1细胞系相关产品：H-2228细胞、COLO-320HSR细胞、Med 341细胞
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
LK 2细胞系相关产品：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
Hs578Bst细胞系相关产品：RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
Ku812F细胞系相关产品：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
LNCaP-Clone-FGC细胞系相关产品：H1954细胞、3T6 Swiss Albino细胞、Tj-905细胞
PIEC细胞系相关产品：SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞
H28细胞系相关产品：H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
H4-II-E细胞系相关产品：Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
NSH细胞系相关产品：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
NW-MEL-38细胞系相关产品：LL/2(LLc1)细胞、D324 Med细胞、NCIH1944细胞
no-11细胞系相关产品：MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
OP9 epithelioid cells小鼠骨髓基质细胞系
HLE B-3细胞系相关产品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞
IAR 20细胞系相关产品：NG-108-15细胞、HIBEC细胞、RINm-5F细胞
HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、Ramos细胞、769-P细胞
PNT1/A细胞系相关产品：HCC-1599细胞、HCC1438细胞、SV-HUC-1细胞
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