RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系

"RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
MDA-MB 231细胞系相关产品：HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
ONS-76细胞系相关产品：3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
Hs606细胞系相关产品：JHH7细胞、HDMEC细胞、Panc 8.13细胞
细胞生长：贴壁
RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SGC-7901细胞系相关产品：NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞
PLA-801C细胞系相关产品：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
RAOEC细胞系相关产品：KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
HCC95细胞系相关产品：RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
CEM-0细胞系相关产品：33604细胞、NCIH1341细胞、NB1-RGB细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品：TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
H1975细胞系相关产品：GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
NCIH1373细胞系相关产品：H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞
B16-F10--RED细胞系相关产品：3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞
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MGC-803细胞系相关产品：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞
RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系
NS1-Ag4/1细胞系相关产品：MHH-CALL2细胞、MDA-MB-175细胞、BHK细胞
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PE/CA-PJ-34细胞系相关产品：SK-OV-433细胞、SUM52细胞、S-16细胞
AR-42J细胞系相关产品：SCC4细胞、RAEC细胞、RCC_7860细胞
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SUM149-PT细胞系相关产品：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
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3T3 Swiss Albino细胞系相关产品：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
NCI-128细胞系相关产品：SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
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NCI-SNU-C1细胞系相关产品：SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞
RKO-AS45-1 epithelioid cells人结肠癌转基因细胞系
2780细胞系相关产品：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞
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