"LSC-1 epithelioid cells大鼠肝星形细胞系
细胞背景资料:肝星形细胞;自发永生;Wistar
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品:Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞
T241细胞系相关产品:JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品:H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
细胞生长:贴壁
LSC-1 epithelioid cells大鼠肝星形细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
H1650_CO细胞系相关产品:SNGM细胞、SW948细胞、H295R细胞
NCI-H1573细胞系相关产品:CCD19-Lu细胞、CNE1-LUC细胞、Scott细胞
CNE2细胞系相关产品:WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LSC-1 epithelioid cells大鼠肝星形细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
Mouse Colon 38细胞系相关产品:KTC1细胞、SNU-484细胞、MDA-231细胞
NCI-H498细胞系相关产品:RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
Caov-4细胞系相关产品:IR983F细胞、Cor L51细胞、SW13细胞
UCLA-SO-M21细胞系相关产品:NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞
Hs840T细胞系相关产品:BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
CAL-27细胞系相关产品:CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
HMrSV5细胞系相关产品:CL11细胞、NCIH1437细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞系相关产品:PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
RPMI 1788细胞系相关产品:Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
LSC-1 epithelioid cells大鼠肝星形细胞系
MT-2J细胞系相关产品:SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
751-NA细胞系相关产品:EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
PASMCS细胞系相关产品:138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
CA922细胞系相关产品:MOLT4细胞、Mv.1.Lu细胞、SK-N-SH细胞
PL11细胞系相关产品:BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞
NCI H226细胞系相关产品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
NCI H226细胞系相关产品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
SNU251细胞系相关产品:LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
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T 84细胞系相关产品:SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞
KP 4细胞系相关产品:Saos2细胞、D341Med细胞、CCD 19Lu细胞
J-111细胞系相关产品:Vero 76 clone E6细胞、LAD2细胞、HT-22细胞
NCI-H1373细胞系相关产品:HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
B16BL6细胞系相关产品:HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
NCIH727细胞系相关产品:NCI-N87细胞、TN5B14细胞、SW1573细胞
WM-115细胞系相关产品:NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
GM17219细胞系相关产品:SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品:JEG-3细胞、SW 839细胞、MCF-7ADR细胞
RBVEC细胞系相关产品:OCI AML2细胞、HDLM2细胞、HBZY 1细胞
BV173细胞系相关产品:RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
LLC-MK-2细胞系相关产品:A-9细胞、SN12CPM6细胞、NCI-H1734细胞
SUIT2细胞系相关产品:rRMECs细胞、PG-4(S+L-)细胞、CHO Lec1细胞
Hs-27细胞系相关产品:SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
Hs 606细胞系相关产品:L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
Huh7.5细胞系相关产品:Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
RPMI8402细胞系相关产品:C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞
AHH-1细胞系相关产品:Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
SGC-996细胞系相关产品:Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
SKGIIIA细胞系相关产品:Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品:LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
NCI-H716细胞系相关产品:GM 637细胞、NT2-D1细胞、PK13细胞
NCI-H322T细胞系相关产品:Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
GM03190A细胞系相关产品:A-253细胞、Fu97细胞、TEC细胞
NCI-H441-4细胞系相关产品:H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
H2087细胞系相关产品:MIN6细胞、HCC0827细胞、CCD-33Co细胞
5-8F细胞系相关产品:Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞
NCI-H920细胞系相关产品:HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
MPASMC细胞系相关产品:Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞
OVCA 433细胞系相关产品:Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞
Panc04.03细胞系相关产品:NK92细胞、NF639细胞、Rabbit Kidney 13细胞
KTCTL-140细胞系相关产品:C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
MuM-2B细胞系相关产品:MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞
JROECL21细胞系相关产品:OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞
MES23.5细胞系相关产品:NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
H1373细胞系相关产品:Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞
KYSE 450细胞系相关产品:Med 283细胞、WM239细胞、SNU354细胞
NRK 52E细胞系相关产品:OVCAR8细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞、GC-1细胞
HCT-8/V细胞系相关产品:DR2R 1610细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、TCCSUP细胞
Hs-695-T细胞系相关产品:H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞
LSC-1 epithelioid cells大鼠肝星形细胞系
MJ细胞系相关产品:RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞
SNU449细胞系相关产品:BNL 1MEA.7R.1细胞、OCI-LY-18细胞、J-774细胞
KNS-42细胞系相关产品:P-388D1细胞、Cates 1B细胞、HMSC细胞
Caov-4细胞系相关产品:IR983F细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、Rat Skin 1细胞
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