HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系

"HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系
细胞背景资料：角膜；内皮细胞；SV４０转化；女性
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
Caco2-BBE细胞系相关产品：Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
MDA-453细胞系相关产品：JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
细胞生长：贴壁
HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
SK-MEL-3细胞系相关产品：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞
HEK293F细胞系相关产品：SUDHL-2细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞、SupT1细胞
PANC 813细胞系相关产品：HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
SNU-C2B细胞系相关产品：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
PLA801-95C细胞系相关产品：NCI-HUT-292细胞、SK Mel 1细胞、H841细胞
P815细胞系相关产品：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
NSC34细胞系相关产品：NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞
HCCLM3细胞系相关产品：HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞
OCI/AML5细胞系相关产品：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
Co 205细胞系相关产品：Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
CAL-12T细胞系相关产品：BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞
Centre Antoine Lacassagne-62细胞系相关产品：MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞
HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系
OV3121细胞系相关产品：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
CAL-148细胞系相关产品：253J-Bladder-V细胞、T-47-D细胞、COLO680N细胞
ketr 3细胞系相关产品：HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞
CEM-C1细胞系相关产品：Reuber H35细胞、AG06814-J细胞、Hs 729细胞
751-NA细胞系相关产品：EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
T98细胞系相关产品：SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
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CCD1112Sk细胞系相关产品：NB1RGB细胞、BL6细胞、MV-4:11细胞
TE-8细胞系相关产品：Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞
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HCC827细胞系相关产品：CAL 148细胞、CHO-S细胞、NTERA-2/D1细胞
293H细胞系相关产品：SMC-1细胞、HEK (AD293)细胞、MSB-1细胞
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HUTU80细胞系相关产品：SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞
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G519细胞系相关产品：NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
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373MG细胞系相关产品：624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
CBRH7919细胞系相关产品：CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞
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JeKo-1细胞系相关产品：UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞
K562/ADR细胞系相关产品：LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
L 929细胞系相关产品：SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
H-2195细胞系相关产品：H-226细胞、Hs683细胞、D324 Med细胞
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
GM03190细胞系相关产品：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
HSC-1细胞系相关产品：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
Huh7.5细胞系相关产品：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
LLC-PK1细胞系相关产品：TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
AdHek细胞系相关产品：BHT101细胞、WPE-int细胞、Hs 766细胞
SK BR 03细胞系相关产品：3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
Strain KB细胞系相关产品：6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
751细胞系相关产品：SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
P3J-HR-1细胞系相关产品：HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞
HCEC-B4G12 epithelioid cells人角膜内皮细胞系
HCC1419细胞系相关产品：Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞
TE 354.T细胞系相关产品：NFHIOSE-80细胞、MC3T3-L1细胞、B78细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、KYSE-270细胞、FRhK-4细胞
PLA801-95C细胞系相关产品：NCI-HUT-292细胞、MM1.S细胞、H-2106细胞
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