"B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系 细胞背景资料:晶状体;Ad12-SV40转化;男性 细胞形态:上皮细胞样 贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉! WIL2 Secreting细胞系相关产品:H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞 DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞 RK-13细胞系相关产品:CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞 细胞生长:贴壁 B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 Caco-2/BBe 1细胞系相关产品:SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞 ST 486细胞系相关产品:HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞 MES13细胞系相关产品:FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞 OCILY3细胞系相关产品:Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞 MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系 细胞生长特性:贴壁 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。 CAL-85-1细胞系相关产品:SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞 BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞 H1404细胞系相关产品:He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞 NIH/3T3细胞系相关产品:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞 293GP细胞系相关产品:BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞 MDA-MB-361细胞系相关产品:LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞 SKOV3细胞系相关产品:MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞 697细胞系相关产品:NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞 Farage细胞系相关产品:NRK clone 52E细胞、NTera2/D1细胞、H-1522细胞 TCC-PAN2细胞系相关产品:Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞 B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系 KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞 746T细胞系相关产品:MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞 FRTL-5细胞系相关产品:Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞 NCI-SNU-886细胞系相关产品:SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞 LS123细胞系相关产品:HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞 HSC3细胞系相关产品:Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞 CAL-78细胞系相关产品:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞 SJ-Rh 30细胞系相关产品:LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞 675T细胞系相关产品:L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞 CHP 100细胞系相关产品:PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞 NCI-H1568细胞系相关产品:MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞 HT115细胞系相关产品:OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞 NCIH1568细胞系相关产品:THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞 Hep 3B细胞系相关产品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞 MDCK II细胞系相关产品:SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞 OCI-AML-3细胞系相关产品:HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞 DiFi细胞系相关产品:SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞 BC3H-1细胞系相关产品:769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞 149 PT细胞系相关产品:Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞 Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞 HuP-T4细胞系相关产品:LAN-6细胞、OCI/AML-2细胞、EL4细胞 BEL 7404细胞系相关产品:Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞 UMUC-14细胞系相关产品:HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞 HemECs细胞系相关产品:Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞 MDA-MB-231细胞系相关产品:KYSE70细胞、MLA-144细胞、CTX TNA2细胞 190PT细胞系相关产品:Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞 NE-1细胞系相关产品:159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞 Ramos(RA1)细胞系相关产品:IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞 PANC-10-05细胞系相关产品:SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞 WB-F344细胞系相关产品:NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞 NCI-HUT-460细胞系相关产品:TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞 Panc 10.05细胞系相关产品:U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞 HC-11细胞系相关产品:Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞 MN-9D细胞系相关产品:Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞 Daudi细胞系相关产品:SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞 DU 145细胞系相关产品:Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞 H2172细胞系相关产品:alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞 NB19-RIKEN细胞系相关产品:MODE-K细胞、NCI-H2342细胞、IPEC-J2细胞 NPA细胞系相关产品:Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞 NCIH1385细胞系相关产品:P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞 HEC-1-A细胞系相关产品:WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞 HGC27细胞系相关产品:SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 Tb1Lu细胞系相关产品:J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞 H1436细胞系相关产品:Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞 SW-1271细胞系相关产品:HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞 H292细胞系相关产品:SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞 H19-7细胞系相关产品:GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞 LK 2细胞系相关产品:MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞 SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞 H2052_MM细胞系相关产品:SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞 B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系 NCI-H2110细胞系相关产品:E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞 WSU-DLCL(2)细胞系相关产品:MDCK细胞、NL-20细胞、CL-11细胞 HS5细胞系相关产品:huH 1细胞、SK-MES-1细胞、Clone 929细胞 H1395细胞系相关产品:MIO-M1细胞、BRL3A细胞、CT26.WT细胞 "
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