MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系

"MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系
细胞背景资料：肺；上皮细胞；SV４０转化；FVB/N
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
MDA-MB415细胞系相关产品：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
MHCC 97细胞系相关产品：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
NCI-H-128细胞系相关产品：RPMI 8226/S细胞、NRK-49F细胞、C-127细胞
细胞生长：贴壁
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
GCT0404细胞系相关产品：HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞
SK-GT-4细胞系相关产品：6-10B细胞、H1963细胞、M2-10B4细胞
H2172细胞系相关产品：alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞
R1800[RA]细胞系相关产品：EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品：PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞
CAL851细胞系相关产品：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞
Hep-3B细胞系相关产品：Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
RGM-1细胞系相关产品：RCC_7860细胞、MDA436细胞、HCC-1143细胞
Eca-109细胞系相关产品：SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞
SW900细胞系相关产品：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
Rat-2细胞系相关产品：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞
D-341细胞系相关产品：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞
H22-H8D8细胞系相关产品：CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系
COR-L88细胞系相关产品：FLC-7细胞、JCA1细胞、H-1385细胞
SKRC-52细胞系相关产品：VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞
A-172细胞系相关产品：SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
P30 OHK细胞系相关产品：Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
HA1800细胞系相关产品：HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞系相关产品：MeWo细胞、HCC-9724细胞、H-520细胞
H3255细胞系相关产品：RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
NCI-SNU-1细胞系相关产品：HCC-78细胞、MGSMC细胞、MH7A细胞
HECV细胞系相关产品：CCD 19Lu细胞、NCTC 3960细胞、PANC-28细胞
H1672细胞系相关产品：MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞
Panc2_03细胞系相关产品：H-1836细胞、D 407细胞、UCLA SO M21细胞
Molm14细胞系相关产品：CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
H1581细胞系相关产品：HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
SNU-869细胞系相关产品：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
C-28/I2细胞系相关产品：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
L cells (TK-)细胞系相关产品：Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞
BC-028细胞系相关产品：FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞
L540细胞系相关产品：MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞
HEK-293H细胞系相关产品：SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
N-87细胞系相关产品：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
A875细胞系相关产品：SNU182细胞、U2932细胞、H820细胞
WC00079细胞系相关产品：A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
2E8细胞系相关产品：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞
GT38细胞系相关产品：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞
Malme-3M细胞系相关产品：NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品：HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
SNU475细胞系相关产品：NCIH661细胞、BEL7402细胞、SJRH30细胞
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
JVM3细胞系相关产品：NCI-SNU-761细胞、MDA-MB-231细胞、SH-SY5Y细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
OVCA432_Bast细胞系相关产品：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
GT38细胞系相关产品：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞
KOSC-2细胞系相关产品：OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
5637细胞系相关产品：2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
H-747细胞系相关产品：HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
H23细胞系相关产品：EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
Strain V细胞系相关产品：NeHepLxHT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、SUDHL6细胞
Leukemia L1210细胞系相关产品：Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
U251细胞系相关产品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
B10BR细胞系相关产品：NCI-H838细胞、OVCA5细胞、IPEC-1细胞
NCI-H1573细胞系相关产品：CCD19-Lu细胞、CNE1-LUC细胞、Scott细胞
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品：Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮细胞系
AG06814-M细胞系相关产品：J774 A.1细胞、SNU-761细胞、Walker/LLC-WRC256细胞
Mono-Mac-1细胞系相关产品：ssMCF7细胞、Epstein-Barr-2细胞、NCIH2227细胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、SR细胞、SKLU-1细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、SKNDZ细胞、NCTC 3960细胞
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