"MN9D epithelioid cells小鼠中脑多巴胺能神经元细胞系 细胞背景资料:多巴胺能神经元细胞 细胞形态:上皮细胞样 贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉! J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞 Kupffer细胞系相关产品:Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞 TCMK1细胞系相关产品:CMT.64细胞、OCI Ly1细胞、H-23细胞 细胞生长:贴壁 MN9D epithelioid cells小鼠中脑多巴胺能神经元细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 SK_HEP1细胞系相关产品:WIL2 S细胞、Panc 03.27细胞、Hk-2细胞 OCI-Ly 1细胞系相关产品:TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞 RCC_7860细胞系相关产品:U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞 UMNSAH-DF 1细胞系相关产品:EOL1细胞、SK.MEL.2细胞、H2052_MM细胞 Lec1细胞系相关产品:ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 MN9D epithelioid cells小鼠中脑多巴胺能神经元细胞系 细胞生长特性:贴壁 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。 MPP89细胞系相关产品:HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞 KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞 A2008细胞系相关产品:OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞 H-187细胞系相关产品:Hs27F细胞、MDA-MB468细胞、JTC-39细胞 NCI-H1436细胞系相关产品:LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞 CL-40细胞系相关产品:HNE-3细胞、HIBEC细胞、NG108-15细胞 B16/F0细胞系相关产品:P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞 NCIH2196细胞系相关产品:HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞 H-226细胞系相关产品:RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞 Vero from pool #76细胞系相关产品:TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞 MN9D epithelioid cells小鼠中脑多巴胺能神经元细胞系 NCI H69细胞系相关产品:SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞 MDA MB 361细胞系相关产品:H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞 NCI-H2196细胞系相关产品:MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞 RGB细胞系相关产品:RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞 PECAPJ34细胞系相关产品:BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞 LS1034细胞系相关产品:NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞 LS1034细胞系相关产品:NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞 Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞 NIH 3T3细胞系相关产品:AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞 IEC6细胞系相关产品:HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞 RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞 Hs940T细胞系相关产品:A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞 EOC-20细胞系相关产品:SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞 OLN-93细胞系相关产品:SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞 AMC-HN8细胞系相关产品:Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞 GM 637细胞系相关产品:TALL 1细胞、MV-1-Lu细胞、HCT15细胞 BE2C细胞系相关产品:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞 Calu-3细胞系相关产品:H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞 Anip-973细胞系相关产品:D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞 SIRC细胞系相关产品:YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞 KBM-7细胞系相关产品:KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞 AC29细胞系相关产品:HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞 BLO11细胞系相关产品:H508细胞、H522细胞、C918细胞 Anip973细胞系相关产品:WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞 Tu-686细胞系相关产品:HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞 H-2110细胞系相关产品:RCC 786-O细胞、Hs-729-T细胞、WC00079细胞 SKHEP-1细胞系相关产品:SNT-8细胞、NCI-H1436细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞 Central Adrenergic TH-expressing a细胞系相关产品:MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞 MDA 1386细胞系相关产品:LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞 L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品:293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞 H378细胞系相关产品:McA-RH 8994细胞、H-929细胞、293H细胞 Neuro2a细胞系相关产品:DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞 SW756细胞系相关产品:UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞 H4IIEC3细胞系相关产品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞 U343MG细胞系相关产品:JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞 L-WRN细胞系相关产品:LC-1细胞、NCIH1836细胞、CW-2细胞 H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞 KMB-17细胞系相关产品:TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞 KMB-17细胞系相关产品:TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞 PGLH7细胞系相关产品:CHL-11细胞、293 EBNA细胞、OACP4C细胞 Mevo细胞系相关产品:Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞 Rat 1细胞系相关产品:HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞 HTR8svn细胞系相关产品:HCC-9204细胞、Panc3_27细胞、HT-144细胞 FK81细胞系相关产品:TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞 PL12细胞系相关产品:16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞 Daudi细胞系相关产品:SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞 KG1A细胞系相关产品:Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞 H-1581细胞系相关产品:NCI-H841细胞、HLE细胞、YH细胞 HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞 NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞 DAN-G细胞系相关产品:aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞 MN9D epithelioid cells小鼠中脑多巴胺能神经元细胞系 TGHAVSMC细胞系相关产品:HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞 GM06141细胞系相关产品:RBL-I细胞、LC1sq细胞、NK62a细胞 SW-48细胞系相关产品:COLO 16细胞、PTK 2细胞、OVMANA细胞 A2008细胞系相关产品:OsACL细胞、PANC.1细胞、NE1-E6E7细胞 "
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