BPH-1 epithelioid cells人前列腺增生细胞系

"BPH-1 epithelioid cells人前列腺增生细胞系
细胞背景资料：良性前列腺增生；男性
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
H 9细胞系相关产品：Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、BE(2)C细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞
COLO 824细胞系相关产品：KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
细胞生长：贴壁
BPH-1 epithelioid cells人前列腺增生细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HEL299细胞系相关产品：SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
SNK-6细胞系相关产品：Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
BEAS 2B细胞系相关产品：NTERA-2细胞、MM1.S细胞、NCI-HUT-125细胞
LTEP-sm 1细胞系相关产品：Mono-Mac-6细胞、UPCI-SCC-090细胞、SNU-475细胞
ME16C细胞系相关产品：NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BPH-1 epithelioid cells人前列腺增生细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
HOP-92细胞系相关产品：L-WRN细胞、SCC25细胞、LA-N-6细胞
GM02219C细胞系相关产品：MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞
BHK-21细胞系相关产品：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞
U373MG细胞系相关产品：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
UT-7细胞系相关产品：HCCC-9810细胞、Panc_04_03细胞、FL62891细胞
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NK92MI细胞系相关产品：KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
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BPH-1 epithelioid cells人前列腺增生细胞系
C-4I细胞系相关产品：BMF细胞、YH-13细胞、Pa18C细胞
HuT-102细胞系相关产品：102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞
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FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
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BrCL18细胞系相关产品：MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
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DU 4475细胞系相关产品：WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
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NCIH345细胞系相关产品：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞
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