"BEND epithelioid cells牛子宫内膜上皮细胞系 细胞背景资料:子宫内膜;上皮细胞;雌性 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 OCI/AML-4细胞系相关产品:IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞 Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞 GM2219C细胞系相关产品:AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞 细胞生长:贴壁 BEND epithelioid cells牛子宫内膜上皮细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 BL6细胞系相关产品:UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞 Y3-Ag1,2,3细胞系相关产品:HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞 SNU182细胞系相关产品:U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞 L-M[TK-]细胞系相关产品:FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞 Panc-02细胞系相关产品:UM-UC3细胞、LC-2 ad细胞、MARC-145细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 BEND epithelioid cells牛子宫内膜上皮细胞系 细胞生长特性:贴壁 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 TE32细胞系相关产品:NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞 MCF-7B细胞系相关产品:Jurkat E6.1细胞、TFK-1细胞、NCIH1703细胞 TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞 HEK (AD293)细胞系相关产品:WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞 SKNBE2细胞系相关产品:PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞 COS1细胞系相关产品:Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞 NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞 H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞 MHCC97H细胞系相关产品:Melanoma 14细胞、M-O7e细胞、H2030细胞 MB468细胞系相关产品:Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞 BEND epithelioid cells牛子宫内膜上皮细胞系 H647ell细胞系相关产品:SMMC-7721细胞、C3H10T1/2细胞、OCIAML4细胞 MNNG/HOS Clone F-5细胞系相关产品:SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞 FU-97细胞系相关产品:NCl-H157细胞、MAD109细胞、Hs819T细胞 HT-3细胞系相关产品:TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞 OVCAR 433细胞系相关产品:COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞 K-562细胞系相关产品:GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞 K-562细胞系相关产品:GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞 UACC 893细胞系相关产品:M2-10B4细胞、RT-BM-1细胞、293S细胞 H-1048细胞系相关产品:3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞 A673细胞系相关产品:MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞 HP615细胞系相关产品:Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞 HCe-8693细胞系相关产品:MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞 L 929细胞系相关产品:SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞 Hs 888Lu细胞系相关产品:Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞 BHK 21细胞系相关产品:NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞 DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞 Ca-Ski细胞系相关产品:LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞 TOV112细胞系相关产品:SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞 MOLT-16细胞系相关产品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞 RMS 13细胞系相关产品:NCI-H1793细胞、EBC1细胞、LC-1Sq细胞 GM3570细胞系相关产品:HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞 ST2细胞系相关产品:R D细胞、RS4:11细胞、Hs675细胞 FDCP-1细胞系相关产品:M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞 YH-13细胞系相关产品:HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞 H1993细胞系相关产品:Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞 WM-266-mel细胞系相关产品:H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞 SUM 190细胞系相关产品:SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞 H-1385细胞系相关产品:WIL2 Secreting细胞、H125细胞、Bat lung细胞 UMRC2细胞系相关产品:32D/cl3细胞、Malme3M细胞、HBZY-1细胞 MSTO-211细胞系相关产品:HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞 IPEC-J2细胞系相关产品:NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞 DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞 D341Med细胞系相关产品:NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞 R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞 1301细胞系相关产品:L cell line细胞、CoCL2细胞、PSN-1细胞 SKNBE(1)细胞系相关产品:WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞 PJ34细胞系相关产品:P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞 Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞 OVCA433_Bast细胞系相关产品:AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞 COV362细胞系相关产品:SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞 OCI-Ly10细胞系相关产品:RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞 Leydig细胞系相关产品:CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞 COLO320 DM细胞系相关产品:RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞 SK Mel28细胞系相关产品:USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞 HuNS1细胞系相关产品:HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞 NCIH345细胞系相关产品:COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞 U 266细胞系相关产品:SUDHL-4细胞、AML-EOL-1细胞、HCS-2/8细胞 KHYG细胞系相关产品:Cates 1B细胞、OVCAR8/ADR细胞、H2172细胞 HCO细胞系相关产品:SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞 Kit225细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞 BEND epithelioid cells牛子宫内膜上皮细胞系 QGY细胞系相关产品:CCD-1112sk细胞、IPLB-SF-21细胞、HCC-4006细胞 RERF-LC-MS细胞系相关产品:NH6细胞、A-498细胞、NCM356细胞 LS174T细胞系相关产品:Rat Lung-65细胞、SHIN-3细胞、MeWo细胞 TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MonoMac1细胞、266 Bl细胞 "
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