hTERT-HPNE epithelioid cells人胰腺导管上皮细胞系

"hTERT-HPNE epithelioid cells人胰腺导管上皮细胞系

细胞背景资料：胰腺导管；HGNC-TERT转化；男性

细胞形态：上皮细胞样

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

GTL 16细胞系相关产品：FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞

MES 13细胞系相关产品：MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞

RBL2H3细胞系相关产品：b.End3细胞、NCTC 929细胞、NCI-SNU-449细胞

细胞生长：贴壁

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

IEC6细胞系相关产品：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞

AK细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞

NCI-H1436细胞系相关产品：LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞

BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞

DH82细胞系相关产品：IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

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细胞生长特性：贴壁

细胞形态特性：详见细胞说明书

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

LAC细胞系相关产品：SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞

GM07404A细胞系相关产品：SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞

HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞

T24细胞系相关产品：KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞

Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞

HN 4细胞系相关产品：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞

Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞

A2780CP70细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞

U20S细胞系相关产品：GP-293细胞、HNE-1细胞、GA-10(Clone 4)细胞

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MUTZ3细胞系相关产品：Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞

PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞

HTori:3细胞系相关产品：KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞

SW 1222细胞系相关产品：H-2029细胞、T. T细胞、CAL 51细胞

GM04678细胞系相关产品：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞

GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞

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H676B细胞系相关产品：CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞

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Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞

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细胞、Hs 888Lu细胞

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IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞

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A101D细胞系相关产品：SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞

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