DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系

"DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系
细胞背景资料：胰腺癌；女性
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
Hs 578T细胞系相关产品：SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞
SW1088细胞系相关产品：P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
SBC-5细胞系相关产品：SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
细胞生长：贴壁
DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
NCIH1581细胞系相关产品：H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞
HeLa-S3细胞系相关产品：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞
TE-3A细胞系相关产品：COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
SKNAS细胞系相关产品：SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
SW 1271细胞系相关产品：J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞
RH-30细胞系相关产品：IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
SV40-HCEC细胞系相关产品：IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品：Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
HT22细胞系相关产品：Ramos细胞、Kato-III细胞、MDA-MB453细胞
LS 1034细胞系相关产品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞
Pa17C细胞系相关产品：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞
FU-OV-1细胞系相关产品：NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞
DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系
Ramos.2G6.4C10细胞系相关产品：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
EnCa1细胞系相关产品：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
A 375细胞系相关产品：Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞
MAC1细胞系相关产品：MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞
BEL7405细胞系相关产品：GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞
MeT-5A细胞系相关产品：A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
WM 2664细胞系相关产品：TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞
HRA19细胞系相关产品：UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
VP267细胞系相关产品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
Human podocyte细胞系相关产品：L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
HNE1细胞系相关产品：RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞
SK-LU-1细胞系相关产品：OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞
RBL.2H3细胞系相关产品：BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞
LA 4细胞系相关产品：T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞
NIE-115细胞系相关产品：MRASMC细胞、Hs852细胞、L5178Y细胞
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
SW 626细胞系相关产品：LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞
HGBEC细胞系相关产品：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞
PLCPRF5细胞系相关产品：SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
Okayama University Medical School-27细胞系相关产品：EHEB细胞、HT 1080.T细胞、2008细胞
WM-266-4细胞系相关产品：CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
H-441细胞系相关产品：769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞
L428细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞
HEK AD293细胞系相关产品：P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞
NU-GC-4细胞系相关产品：TK-1细胞、Ramos G6.C10细胞、BERH-2细胞
L Wnt-3A细胞系相关产品：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞
PANC-28细胞系相关产品：CHAGOK1细胞、NCI-H510A细胞、H-EMC-SS细胞
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞
H441细胞系相关产品：HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
NCI-H865细胞系相关产品：SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞
SCC-4细胞系相关产品：NCIH1048细胞、TE7细胞、SUM-149PT细胞
149PT细胞系相关产品：MOLT-4细胞、NCIH2405细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
4T1-LUC细胞系相关产品：HEL-92.1.7细胞、BT-325细胞、H650细胞
CCD19Lu细胞系相关产品：Kasumi-1细胞、McA-RH7777细胞、Kit-225细胞
X63细胞系相关产品：MPASMC细胞、C8-D1A细胞、SU4细胞
CV-1 in Origin Simian-1细胞系相关产品：H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
L02细胞系相关产品：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品：211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
SW900细胞系相关产品：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
HIEC6细胞系相关产品：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
SIRC细胞系相关产品：YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
SKN-SH细胞系相关产品：Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞
T-47-D细胞系相关产品：BTI-TN5B1-4细胞、Panc_08_13细胞、KMST6细胞
C12细胞系相关产品：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
HOS TE85细胞系相关产品：Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞
DAN-G epithelioid cells人胰腺癌细胞系
U138-MG细胞系相关产品：HN-6细胞、ST-2细胞、BIU87细胞
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、MDST8细胞、UT-7细胞
RT4-D6-P2T细胞系相关产品：CAKI.1细胞、SCC090细胞、MSTO-211H细胞
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、HNE2细胞、OCI AML3细胞
"