NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系

"NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞背景资料：皮肤；成纤维细胞；男性
细胞形态：成纤维细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
H1975细胞系相关产品：GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
TFH细胞系相关产品：RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
NCI-H378细胞系相关产品：WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞
细胞生长：贴壁
NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PA I细胞系相关产品：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
QGY 7701细胞系相关产品：NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞
PC12(高分化)细胞系相关产品：Oregon J-111细胞、HO-1-N-1细胞、PC3细胞
H-1385细胞系相关产品：WIL2 Secreting细胞、H125细胞、Bat lung细胞
WEHI231细胞系相关产品：LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
MDA MB 134VI细胞系相关产品：KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
Panc 08.13细胞系相关产品：AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞
MG63细胞系相关产品：SW 1271细胞、VP 229细胞、SW 13细胞
H9c2 (2-1)细胞系相关产品：HT clone H9细胞、SKRC-52细胞、LIPF155C细胞
SK-MEL-5细胞系相关产品：H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞系相关产品：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞
RK 13细胞系相关产品：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞
MC57G细胞系相关产品：HTR8svn细胞、MIA Paca2细胞、HT144细胞
KFB细胞系相关产品：YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
LLC细胞系相关产品：SK-RC 52细胞、Eca 109细胞、OCI-AML-2细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
HO-8910 PM细胞系相关产品：CL-40细胞、H-2227细胞、NCI-H345细胞
NCIH1869细胞系相关产品：H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞
Hep G2/C3A细胞系相关产品：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品：A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品：A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
HAVSMC细胞系相关产品：HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
87MG细胞系相关产品：BJA-B-1细胞、SK-RC 42细胞、GA10细胞
RPMI8226细胞系相关产品：TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
Ramos.2G6.4C10细胞系相关产品：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞
BIU-87细胞系相关产品：HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞
KTC-1细胞系相关产品：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞
IR 983F细胞系相关产品：MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞
IOSE80UBC细胞系相关产品：HBL1细胞、SW 962细胞、NCIH2141细胞
H22细胞系相关产品：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
MC/CAR细胞系相关产品：A-2058细胞、A 72细胞、WEHI 3B细胞
TGW细胞系相关产品：Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
451-LU细胞系相关产品：U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞
As-PC1细胞系相关产品：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
NB9细胞系相关产品：WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞
32D clone3细胞系相关产品：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
H810细胞系相关产品：C-6细胞、L-929细胞、SW 756细胞
MEL细胞系相关产品：RS411细胞、QGP1细胞、TE 85 ClF-5细胞
HRCEC细胞系相关产品：Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞
WISH细胞系相关产品：OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
H774细胞系相关产品：IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
RT 112细胞系相关产品：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞
Bovine Turbinate细胞系相关产品：MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
NCIH1869细胞系相关产品：H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品：MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
McArdle RH-7777细胞系相关产品：WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞
MDAMB231细胞系相关产品：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
BALB/c 3T3 clone A31细胞系相关产品：SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞
RT 112细胞系相关产品：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞
NCI-H441-4细胞系相关产品：H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
RPPVEC细胞系相关产品：H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞
NMC-G1细胞系相关产品：MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
MOLT3细胞系相关产品：NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
LWnt3A细胞系相关产品：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
NCI-H1838细胞系相关产品：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
CF-PAC1细胞系相关产品：NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
NB1RGB fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
TE-13细胞系相关产品：Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞
HRGEC细胞系相关产品：OCI-LY-18细胞、MDA-231细胞、TCam-2细胞
HOS-MNNG细胞系相关产品：GB1细胞、SK Mel28细胞、NCIH1734细胞
MG63细胞系相关产品：SW 1271细胞、C4-2 B细胞、WEHI-231细胞
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