TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系

"TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
BN-CL2细胞系相关产品：SW-1271细胞、OCI/AML-4细胞、Calu-3细胞
C2A细胞系相关产品：HaCaT细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、Hs445细胞
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
细胞生长：悬浮
TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：维持细胞浓度在３×１０４-５×１０５ cells/ml；２-３天换液１次。
Lieming Xu-2细胞系相关产品：HSC细胞、H810细胞、U251n细胞
Hepa1-6细胞系相关产品：Dx5细胞、CATH-a细胞、SAS细胞
HSC-6细胞系相关产品：PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
HUT-28细胞系相关产品：P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞
KYSE 50细胞系相关产品：HeLa S3细胞、HM1900细胞、Huh7.5.1细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：淋巴母细胞样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
G361细胞系相关产品：EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞
MV4II细胞系相关产品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞
NCI H226细胞系相关产品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
Huh7.5.1细胞系相关产品：H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
GCT0404细胞系相关产品：HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品：211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
C-33 A细胞系相关产品：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
BNCL-2细胞系相关产品：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞
TE-14细胞系相关产品：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞
TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系
LOU-NH-91细胞系相关产品：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
SNU-216细胞系相关产品：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞
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T2细胞系相关产品：HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞
GM2131细胞系相关产品：RT-112细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、PIEC细胞
Hs675细胞系相关产品：H-1755细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞、Panc 1细胞
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DHL-4细胞系相关产品：NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞
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McA-RH 8994细胞系相关产品：A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
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KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
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Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞系相关产品：SK-MES1细胞、P3.653细胞、Human Embryonic Skin细胞
DLD 1细胞系相关产品：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
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TF-1 Lymphoblastoid cells人红系白血病细胞系
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NCI H226细胞系相关产品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、NCI-H1436细胞、CCRFCEM细胞
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