EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系

"EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞
Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品：BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
细胞生长：悬浮
EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：４ X １０５ cells/mL and maintain at between ４ X １０５ and １ X １０６ cells/mL.，每２-３天换液
HELA-GFP细胞系相关产品：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
EFM-19细胞系相关产品：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
SU-DHL-10细胞系相关产品：BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞
HCC1500细胞系相关产品：OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞
HCC-1359细胞系相关产品：SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞生长特性：悬浮生长 
细胞形态特性：淋巴母细胞样
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
NCI-747细胞系相关产品：Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞
SACC-LM细胞系相关产品：HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
HEI193细胞系相关产品：DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞
SK-OV-3细胞系相关产品：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞
Mv1Lu细胞系相关产品：P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
Hep-3B细胞系相关产品：Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
PBL细胞系相关产品：H35细胞、RAW 264.7细胞、MA-782细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品：HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
HEK293A细胞系相关产品：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
IAR 20细胞系相关产品：NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞
HSC-4细胞系相关产品：RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
BALL-1细胞系相关产品：HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞
OVCA432_Bast细胞系相关产品：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
GA-10-Clone-4细胞系相关产品：MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
C 643细胞系相关产品：NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
130-T细胞系相关产品：G361-mel细胞、Pt-K2细胞、SUM 159PT细胞
NCIH522细胞系相关产品：Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
SJRH-30细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
NS20-Y细胞系相关产品：F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
MUM2B细胞系相关产品：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞
MDA-MB 361细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
HT3细胞系相关产品：FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞
PLA801C细胞系相关产品：MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
HCASMC细胞系相关产品：NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
LAN-6细胞系相关产品：H82sclc细胞、207细胞、CFPAC细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品：MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
HS-729细胞系相关产品：Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、SKNMC细胞、RPMI 6666细胞
PFSK-1细胞系相关产品：GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
DR2R1610细胞系相关产品：253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
NCI-H1869细胞系相关产品：LS-1034细胞、ssMCF7细胞、TGHAVSMC细胞
SMA560细胞系相关产品：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
H-2444细胞系相关产品：CAL85-1细胞、PA-1细胞、NCI-H1341细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品：CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
NCI-H1155细胞系相关产品：H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
HDSMC细胞系相关产品：LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞
EFO 27细胞系相关产品：TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞
HELA-GFP细胞系相关产品：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
MDAMB468细胞系相关产品：HT1080细胞、BC-023细胞、IM9细胞
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
HD11细胞系相关产品：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞
HCCC-9810细胞系相关产品：ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
HEK 293FT细胞系相关产品：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
GTL16细胞系相关产品：NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
SF 763细胞系相关产品：GM2131细胞、RD细胞、HT-29细胞
J82 COT细胞系相关产品：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞
HNE2细胞系相关产品：SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
NCI-H2444细胞系相关产品：MPC-5细胞、NCI-H2009细胞、KPL4细胞
NCIH211细胞系相关产品：NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞
EB2 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
hOMF细胞系相关产品：Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞
138 MG细胞系相关产品：HCC-9724细胞、MCA38细胞、293S细胞
GM03671C细胞系相关产品：JTC-28细胞、LTEP-s细胞、Colo741细胞
SACC-LM细胞系相关产品：HIEC6细胞、CD18细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞
"