REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系

"REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
16HBEo-细胞系相关产品：NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
CEM C7细胞系相关产品：NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品：ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
细胞生长：悬浮
REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：３—１：６传代，２-３天换液１次
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
H920细胞系相关产品：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
BNCL2细胞系相关产品：H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
BNCL-2细胞系相关产品：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系
细胞生长特性：悬浮生长 
细胞形态特性：淋巴母细胞样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
P3/X63/Ag8细胞系相关产品：NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
WM 239A细胞系相关产品：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
IMR 90细胞系相关产品：SNU-398细胞、SCLC-21H细胞、Sp2/mIL-6细胞
MiaPaCa-2细胞系相关产品：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞
AG06814-N细胞系相关产品：H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品：Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
SkChA-1细胞系相关产品：CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞
SK-N-BE(2)-M17细胞系相关产品：MAntle cell VERona-1细胞、Mono-Mac-1细胞、J111细胞
REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系
SW-579细胞系相关产品：OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
A 172细胞系相关产品：A427细胞、BEAS2B细胞、Tissue Culture-1细胞
RT-BM细胞系相关产品：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
Ca 9-22细胞系相关产品：Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品：GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品：GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
PCI-04B细胞系相关产品：CAL 39细胞、SUM 190PT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞
X63-Ag8.653细胞系相关产品：LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
HCC2935细胞系相关产品：GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品：SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
U251MG细胞系相关产品：3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞
COLO.205细胞系相关产品：PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞
CW-2细胞系相关产品：NCIH2066细胞、C-4 I细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
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INS-1E细胞系相关产品：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞
G361mel细胞系相关产品：VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品：LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
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MADB 106细胞系相关产品：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
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RPMI-7666细胞系相关产品：T HEECs细胞、NTERA-2/D1细胞、Hs281T细胞
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C4-2B细胞系相关产品：H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞
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NCI-H441细胞系相关产品：HCC-366细胞、MN 60细胞、DITNC1细胞
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H-345细胞系相关产品：V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞
MV411细胞系相关产品：SCC7细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、PFSK细胞
SVOG细胞系相关产品：Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
WM 2664细胞系相关产品：TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞
brain-derived Endothelial cells.3细胞系相关产品：NH-6细胞、RPMI 7951细胞、OCI-Ly 3细胞
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
SNU251细胞系相关产品：LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
EFM192C细胞系相关产品：C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞
HREC细胞系相关产品：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
NUGC-2细胞系相关产品：LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤细胞系
MILE SVEN1细胞系相关产品：3T3-A31细胞、HuH7细胞、IFRS1细胞
NCI-H1882细胞系相关产品：HOPC细胞、Sup T-1细胞、A2008细胞
CNE1细胞系相关产品：OE33细胞、MIMVEC细胞、SHEE细胞
PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCC1599细胞
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