6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系

"6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
NCI-522细胞系相关产品：SR细胞、He La细胞、TE14细胞
HCC-1569细胞系相关产品：WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞
hTERT RPE-1细胞系相关产品：QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞
细胞生长：悬浮
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２传代
Kelly细胞系相关产品：OSC19细胞、CHL-IU细胞、CCD-1095Sk细胞
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
NHLF细胞系相关产品：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
HEK 293FT细胞系相关产品：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
Hs695细胞系相关产品：NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品：ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
MCF10A细胞系相关产品：NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
EA hy 926细胞系相关产品：GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
B16/BL6细胞系相关产品：ketr 3细胞、Huh-7.5细胞、RWPE2细胞
SW 48细胞系相关产品：HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞
MLMEC细胞系相关产品：U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞
CV-1细胞系相关产品：CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞
CT26细胞系相关产品：H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
NCIH1836细胞系相关产品：WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
OK-WT细胞系相关产品：BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
HMO6细胞系相关产品：NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
IEC 6细胞系相关产品：NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
A 253细胞系相关产品：P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品：Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
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Ramos细胞系相关产品：CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞
C-26细胞系相关产品：NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
SNU-1040细胞系相关产品：SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
HSC 3细胞系相关产品：P1-Raji细胞、YES2细胞、SNU368细胞
IMR90细胞系相关产品：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
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CCD-112 CoN细胞系相关产品：266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞
NuTu 19细胞系相关产品：RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
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RKOE6细胞系相关产品：SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
HAVSMC细胞系相关产品：HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
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NCI-H2106细胞系相关产品：Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞
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2V6.11细胞系相关产品：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
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SGC7901/DDP细胞系相关产品：MHCC 97-H细胞、SUM190PT细胞、Co-115细胞
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MOLT-4细胞系相关产品：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞
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NTERA2-D1细胞系相关产品：TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
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SW48细胞系相关产品：NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
P3X63 Ag8.653细胞系相关产品：Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞
SK-ES-1细胞系相关产品：CD18/HPAF细胞、GCT细胞、N87细胞
C 643细胞系相关产品：NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
OCI/AML4细胞系相关产品：SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
MKN 7细胞系相关产品：MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
Calu 6细胞系相关产品：LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、MONO-MAC 6细胞、KYSE0030细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、AML-12细胞、SK.OV.3细胞
EA hy 926细胞系相关产品：GM00637B细胞、NCIH1155细胞、Sp 2817细胞
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