KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病细胞系

"KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病细胞系
细胞背景资料：慢性髓白血病；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
H2009细胞系相关产品：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞
WTRL1细胞系相关产品：AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
LCLC103H细胞系相关产品：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞
细胞生长：悬浮
KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Det 562细胞系相关产品：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞
H-740细胞系相关产品：UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
16HBE140细胞系相关产品：NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
NCIH1930细胞系相关产品：Hs888Lu细胞、LLC1细胞、NCI-H676细胞
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
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SEG1细胞系相关产品：NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
HSC/mHSC细胞系相关产品：Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞
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KBM-5 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病细胞系
NCIH2110细胞系相关产品：CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞
OVCA8细胞系相关产品：GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
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Calu 6细胞系相关产品：LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
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NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
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NCI H295R细胞系相关产品：NCI-H1092细胞、RERFLCMS细胞、SUIT2细胞
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PANC-04-03细胞系相关产品：MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞
KU-19-19细胞系相关产品：MM1.S细胞、A-2780细胞、EM-3细胞
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