"TALL-104 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴细胞白血病细胞系 细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;男性 细胞形态:淋巴母细胞样 细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。 Lu-65细胞系相关产品:LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞 H548细胞系相关产品:Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞 Ramos G6.C10细胞系相关产品:SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞 细胞生长:悬浮 TALL-104 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴细胞白血病细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 UCLA-SO-M14细胞系相关产品:C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞 Lu-165细胞系相关产品:HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞 A549/DDP细胞系相关产品:NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞 HEK-EBNA细胞系相关产品:SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞 Adeno 293细胞系相关产品:COLO-824细胞、Hep-G2/C3A细胞、HCAEC细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 TALL-104 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴细胞白血病细胞系 细胞生长特性:悬浮 细胞形态特性:详见细胞说明书 为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。 MC116细胞系相关产品:Hs839.T细胞、SCaBER细胞、IHHA-1细胞 K299细胞系相关产品:CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞 DHL-4细胞系相关产品:NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞 IPI-2I细胞系相关产品:KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞 343 MG细胞系相关产品:SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞 AX-Mel细胞系相关产品:TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞 HUT-28细胞系相关产品:P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞 G401细胞系相关产品:PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞 hTERT RPE-1细胞系相关产品:QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞 SLK细胞系相关产品:SUM-52-PE细胞、SK_N_BE2C细胞、CAMA细胞 TALL-104 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴细胞白血病细胞系 TFK1细胞系相关产品:ID8细胞、H520细胞、HCC1143细胞 H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞 KYSE70细胞系相关产品:TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞 TOV-112细胞系相关产品:SW-626细胞、RWPE2细胞、RCSMC细胞 HGBEC细胞系相关产品:BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞 HL-7702细胞系相关产品:Ly3细胞、H508细胞、BPH1细胞 HL-7702细胞系相关产品:Ly3细胞、H508细胞、BPH1细胞 H-548细胞系相关产品:HHL-5细胞、BMSC/hBMSCs细胞、HR8348细胞 3T3-A31细胞系相关产品:RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞 UACC-893细胞系相关产品:HGC27细胞、NCIH810细胞、NB19细胞 GM04678细胞系相关产品:P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞 SKLU01细胞系相关产品:WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞 Hs 870.T细胞系相关产品:RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞 OVCAR420细胞系相关产品:SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞 NB1RGB细胞系相关产品:SK-MEL-2-LUC细胞、H-1819细胞、SHIN-3细胞 GC9811-P细胞系相关产品:Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞 DV90细胞系相关产品:SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞 Fetal Human Lens-124细胞系相关产品:bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞 J45.01细胞系相关产品:H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞 SV40-HCEC细胞系相关产品:IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞 Kit 225细胞系相关产品:NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞 H-889细胞系相关产品:NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞 PC3-M细胞系相关产品:Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞 BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞 rRTEC细胞系相关产品:H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞 HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞 L-Wnt-3A细胞系相关产品:MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞 SK_N_FI细胞系相关产品:UMUC1细胞、SUDHL4细胞、HMC-1细胞 KBM-5细胞系相关产品:BPH-1细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、Oregon J-111细胞 KMS11细胞系相关产品:B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞 B4G12细胞系相关产品:MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞 EJ 138细胞系相关产品:IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞 HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞 SW 1271细胞系相关产品:J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞 WM115mel细胞系相关产品:Panc203细胞、HTori-3.1细胞、UCLA RO-81A-1细胞 NCI-H87细胞系相关产品:7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞 HOS TE85细胞系相关产品:Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞 SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞 UMR-106细胞系相关产品:NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞 Line 207细胞系相关产品:HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞 LIPF178C细胞系相关产品:NEC8细胞、GM04154细胞、C41细胞 KHYG1细胞系相关产品:no-11细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞、P30OHK细胞 HPMC细胞系相关产品:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞 CEM.C1细胞系相关产品:10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞 MDA-MB361细胞系相关产品:DMS-53细胞、LA4细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞 Panc 03.27细胞系相关产品:Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞 MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞 HEK-293F细胞系相关产品:Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞 Turbot Embryonic Cell line细胞系相关产品:RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞 ROS-17/2.8细胞系相关产品:MDA2B细胞、COLO 824细胞、GM03570E细胞 NCI-H716细胞系相关产品:GM 637细胞、NT2-D1细胞、PK13细胞 TALL-104 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴细胞白血病细胞系 COLO-357细胞系相关产品:SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞 HTh-74细胞系相关产品:Mel-MeWo细胞、EB2细胞、HPB/ALL细胞 SCaBER细胞系相关产品:QGY7703细胞、Panc327细胞、870细胞 DHL-4细胞系相关产品:NTHY-ORI3.1细胞、Mink Lung细胞、MOLM13细胞 "
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