"COLO 320HSR Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料:该细胞1984年建系,源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fu治疗后的腹水。
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养更好经验详解:1)收到细胞,首先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察,细胞初步没有问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,次处理也可以依照第二种情况。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
COLO 320HSR Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
SJ-Rh 30细胞系相关产品:LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
Hs 343.T细胞系相关产品:TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞
293-EBNA细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞
细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H-2198细胞系相关产品:KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
Huh-7.5.1细胞系相关产品:L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
A2058细胞系相关产品:SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
细胞生长特性:半贴壁生长
COLO 320HSR Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
HCC 38细胞系相关产品:NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
COLO.205细胞系相关产品:PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞
MCA-38细胞系相关产品:MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞
LIM 1215细胞系相关产品:U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
TC-1[JHU-1]细胞系相关产品:OCI/AML5细胞、BEL/FU细胞、MLA 144细胞
HEK-AD293细胞系相关产品:KASUMI1细胞、ROS1728细胞、LA-N-5细胞
OCI-Ly 10细胞系相关产品:IEC 18细胞、HLE B-3细胞、WILL-2细胞
C33-A细胞系相关产品:OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
AN3细胞系相关产品:Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品:WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
CAL-51细胞系相关产品:WEHI 164细胞、HMVEC细胞、MC3T3细胞
NCIH209细胞系相关产品:LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品:A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
COLO 320HSR Adherent人结直肠腺癌细胞系
PaTu-8988s细胞系相关产品:8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
C 643细胞系相关产品:NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
M07e细胞系相关产品:BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
KM12 SM细胞系相关产品:Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
HEK-293 c18细胞系相关产品:brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
BHT101细胞系相关产品:NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
LNCaP FGC细胞系相关产品:H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞
LADMAC细胞系相关产品:TO175T细胞、MRC 5细胞、FHCRC subclone 11细胞
ARO 81-1细胞系相关产品:FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
MDA330细胞系相关产品:Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞
EJ-1细胞系相关产品:Functional Liver Cell-7细胞、FHCRC subclone 11细胞、Cor L88细胞
THLE-3细胞系相关产品:Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞
RH8994细胞系相关产品:SVGp12细胞、Opossum Kidney细胞、NCI-H3255细胞
MES23.5细胞系相关产品:NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
GM05372E细胞系相关产品:SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
HELA-GFP细胞系相关产品:251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品:GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞
KU812-F细胞系相关产品:639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
mIMCD-3细胞系相关产品:NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
NCIADR.RES细胞系相关产品:SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
Hs-578-T细胞系相关产品:H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞
CD18细胞系相关产品:LUDLU 1细胞、MARC-145细胞、HCC0827细胞
SUM102PT细胞系相关产品:H-920细胞、TE 354.T细胞、Chang liver细胞
OVCA 420细胞系相关产品:IOSE 80细胞、RT-112细胞、NK92MI细胞
MDA-MB-435 S细胞系相关产品:MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品:OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
SupT1细胞系相关产品:HB611细胞、HCC1171细胞、H4-IIE-C3细胞
NCI-H69细胞系相关产品:H735细胞、PL 45细胞、MHCC 97-H细胞
H1650细胞系相关产品:H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞
SW 837细胞系相关产品:NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞
SW 1990细胞系相关产品:MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞
NCI-H2227细胞系相关产品:H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞
Caco2BBe细胞系相关产品:Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞
H2198细胞系相关产品:Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞
BL1339细胞系相关产品:L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
SK MEL 5细胞系相关产品:OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞
A2780/CP细胞系相关产品:HGC-27细胞、Hs-746T细胞、SNU-601细胞
COLO 320HSR Adherent人结直肠腺癌细胞系
NCIH748细胞系相关产品:A375S2细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞、SUDHL-10细胞
MC/CAR细胞系相关产品:A-2058细胞、A 72细胞、WEHI 3B细胞
NCI-H1944细胞系相关产品:RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞
WEHI-231细胞系相关产品:NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品:AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
32D clone3细胞系相关产品:A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
D283MED细胞系相关产品:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
WEHI 3B细胞系相关产品:Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞
NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞
SiHa细胞系相关产品:SW 620细胞、P3-X63-Ag8细胞、MDA-134细胞
NCIH1395细胞系相关产品:C2-C12细胞、NCIH2172细胞、CAL 51细胞
MCA-38细胞系相关产品:MILE SVEN 1细胞、GM02219C细胞、HCC202细胞
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