"U2OS Cells|人骨肉瘤细胞系
细胞背景资料:骨肉瘤;女性
细胞形态:上皮细胞样
3T3-Swiss细胞系相关产品:SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
GM17346细胞系相关产品:A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
OLN93细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
细胞生长:贴壁
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
U2OS Cells|人骨肉瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SHEE细胞系相关产品:COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞
SHI-1细胞系相关产品:T24(ECV304)细胞、C32r细胞、A 172细胞
PG-4(S+L-)细胞系相关产品:F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞
266 Bl细胞系相关产品:GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
U2OS Cells|人骨肉瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁
HEL92.1.7细胞系相关产品:MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞
RIN-m5F细胞系相关产品:NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品:293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
T 24细胞系相关产品:MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记好的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
H4IIEC3细胞系相关产品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞
Kit-225-K6细胞系相关产品:OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE8.1/2细胞
SH-SY5Y Parental细胞系相关产品:KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞
HGF-1细胞系相关产品:PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞
KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
HuH-28细胞系相关产品:MCCAR细胞、Hs934T细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞
HA1800细胞系相关产品:HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
MMAc.SF细胞系相关产品:PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞
U2OS Cells|人骨肉瘤细胞系
LLC-PK1细胞系相关产品:TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
253J B-V细胞系相关产品:MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞
H-2085细胞系相关产品:BC-PAP细胞、GTL16细胞、NCTC 3960细胞
ADR-RES细胞系相关产品:SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品:C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
OV3121细胞系相关产品:BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
Reuber-H-35 hepatoma细胞系相关产品:HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞
C4-2细胞系相关产品:BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
NCI-H520细胞系相关产品:Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
UPCI-SCC090细胞系相关产品:L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞
P3-X63Ag8细胞系相关产品:HCC 2185细胞、Reuber H35细胞、H460细胞
SK.MEL.28细胞系相关产品:H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞
H35细胞系相关产品:OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
N9细胞系相关产品:KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞
HS-766-T细胞系相关产品:HuCCT-1细胞、COLO 394细胞、ONS-76细胞
SCC 4细胞系相关产品:JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
MLE12细胞系相关产品:KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
HOP92细胞系相关产品:MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品:Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
NHEK细胞系相关产品:MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞
L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
FM-88细胞系相关产品:KM H-2细胞、MC26细胞、N1E115细胞
HS852.T细胞系相关产品:HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
DHL8细胞系相关产品:Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、Hu-P-T4细胞、SBC5细胞
MOLP-2细胞系相关产品:NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
HMVEC细胞系相关产品:NCI H226细胞、MCF12A细胞、H4细胞
MN9D细胞系相关产品:U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞
CL 1-0细胞系相关产品:HFT-8810细胞、U373-MG细胞、NCI-H292细胞
CT26细胞系相关产品:H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
GM-3573细胞系相关产品:CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
CAL 27细胞系相关产品:NIH:OVCAR-4细胞、OCI Ly19细胞、H1373细胞
BL1339细胞系相关产品:L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
PC9细胞系相关产品:CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞
NL20SV细胞系相关产品:MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
MMQ细胞系相关产品:Potorous tridactylus Kidney 2细胞、PANC0504细胞、EBTr (NBL-4)细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
Hs852T细胞系相关产品:UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞
IALM细胞系相关产品:DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
OCM1细胞系相关产品:CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞
MT-4细胞系相关产品:HPAC细胞、PANC0813细胞、BBE细胞
TCMK-1细胞系相关产品:L-02细胞、LM1细胞、NCIH28细胞
HO8910/PM细胞系相关产品:Bac12F5细胞、U-118-MG细胞、MUS-M1细胞
Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞
PLA 802细胞系相关产品:MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
L-M[TK-]细胞系相关产品:FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞
SW 1088细胞系相关产品:NTera2/D1细胞、Hs888T细胞、ECV 304细胞
PTK 2细胞系相关产品:COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
U2OS Cells|人骨肉瘤细胞系
PIG1细胞系相关产品:L78细胞、COLO_320DM细胞、HFT 8810细胞
HSC-2细胞系相关产品:Hs-578-T细胞、LSC-1细胞、KP4细胞
SH-SY5Y Parental细胞系相关产品:KYSE-70细胞、KP2细胞、MV4;11细胞
Hs940.T细胞系相关产品:RGB细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、130T细胞
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