"PL45 Adherent人胰腺导管腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PL45 Adherent人胰腺导管腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
MOLT3细胞系相关产品:NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
HNE3细胞系相关产品:GM04678细胞、KYSE-410细胞、LM-TK-细胞
GM02132细胞系相关产品:SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Mino细胞系相关产品:EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞
HeLa S 3细胞系相关产品:YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
HepG2-luc细胞系相关产品:SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
细胞生长特性:贴壁生长
PL45 Adherent人胰腺导管腺癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
SNU407细胞系相关产品:NCI-BL6细胞、SNU251细胞、OVCAR.4细胞
JJN3细胞系相关产品:DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
NCI-460细胞系相关产品:CAL12T细胞、GFP-Olig2细胞、MKN-7细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
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3T3 clone A31细胞系相关产品:EC-109细胞、NB-4细胞、BDCM细胞
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HCC1395细胞系相关产品:COLO-829细胞、3T6细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞
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PL45 Adherent人胰腺导管腺癌细胞系
NK-92MI细胞系相关产品:SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
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NCI-HUT-125细胞系相关产品:Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞
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NCIH2066细胞系相关产品:CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
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CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
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OCI AML3细胞系相关产品:SW 839细胞、MOLP-8细胞、OVISE细胞
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U87MG细胞系相关产品:OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞
PL45 Adherent人胰腺导管腺癌细胞系
BC-019细胞系相关产品:OVCAR 8细胞、VMRC-RCZ细胞、Jurkat细胞
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H-2347细胞系相关产品:Anglne细胞、WM-239细胞、TCC Sup细胞
Ca 9-22细胞系相关产品:Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
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