"Y-79 Adherent人视网膜母瘤细胞系
细胞背景资料:1971年1月,该细胞由ReidTW及其同事从病人右眼切除的肿瘤进行原代培养建立而成,此病人有很强的视网膜母细胞瘤的母系家族遗传性。该细胞的超微结构,如核膜内折、三层膜结构、大的被膜小泡、环孔板、微管、中心粒、基粒等都与原始肿瘤相似。
细胞形态:上皮细胞样
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Y-79 Adherent人视网膜母瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
KYSE-50细胞系相关产品:Hs604T细胞、Calu 3细胞、SW 620细胞
bEnd3细胞系相关产品:OCI-LY-7细胞、T 98 G细胞、HEL9217细胞
Clone Y1细胞系相关产品:COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
HEK-293-F细胞系相关产品:201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
SUP T1细胞系相关产品:BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞
细胞生长特性:悬浮生长
Y-79 Adherent人视网膜母瘤细胞系
细胞形态特性:圆形,成簇生长
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
PC-3/M细胞系相关产品:184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞
GM03573细胞系相关产品:L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞
Hs 675.T细胞系相关产品:PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞
LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞
A2780CP细胞系相关产品:SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞
HEK;293细胞系相关产品:HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
MES 23.5细胞系相关产品:C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
CA-OV-3细胞系相关产品:HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞
MDA468细胞系相关产品:QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
COLO 741细胞系相关产品:NCI-H820细胞、hs 68细胞、LA-795细胞
OCI-AML-3细胞系相关产品:HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
Y-79 Adherent人视网膜母瘤细胞系
KM933细胞系相关产品:Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
PG-4(S+L-)细胞系相关产品:F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞
T-84细胞系相关产品:SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞
T-84细胞系相关产品:SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞
BEL 7405细胞系相关产品:NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品:NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品:U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
NCI-H1734细胞系相关产品:IEC-6细胞、SKO-007细胞、RPE1细胞
C-4 I细胞系相关产品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞
MDAMB157细胞系相关产品:MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
A704细胞系相关产品:VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞
MALME 3M细胞系相关产品:A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞
HANK-1细胞系相关产品:HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞
SW 1573细胞系相关产品:Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
SSP-25细胞系相关产品:NIH 3T3细胞、MDCK细胞、MCF10-A细胞
Turbot Embryonic Cell line细胞系相关产品:RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
SUM190细胞系相关产品:SW 780细胞、JURKAT E-61细胞、SCC15细胞
GalK 1细胞系相关产品:Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
RBL-I细胞系相关产品:PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞
LMTK-细胞系相关产品:ECV细胞、MUM2B细胞、MOLM-13细胞
HONE1细胞系相关产品:T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
KU 19-19细胞系相关产品:Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
624-mel细胞系相关产品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、aNK细胞、NUGC-2细胞
MCF 10A细胞系相关产品:OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
H9c2 (2-1)细胞系相关产品:HT clone H9细胞、SKRC-52细胞、LIPF155C细胞
DH 82细胞系相关产品:A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
K7M2-WT细胞系相关产品:SW.620细胞、CMT93细胞、SCL-I细胞
A549 ATCC细胞系相关产品:ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞
M20 [Human melanoma]细胞系相关产品:WM115细胞、MeT5A细胞、SUM 159细胞
U343MG细胞系相关产品:JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
CCD18细胞系相关产品:T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞
NCIH2172细胞系相关产品:MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
CAL 33细胞系相关产品:HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品:NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
SNUC2A细胞系相关产品:A 549细胞、Panc_02_03细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
SKN-AS细胞系相关产品:NCI-H1238细胞、Glioma-261细胞、Earle's L cells细胞
KM-12细胞系相关产品:T8细胞、MZCRC1细胞、U-251 MG细胞
MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
L-6细胞系相关产品:L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
Y-79 Adherent人视网膜母瘤细胞系
U-343细胞系相关产品:P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
HT144-mel细胞系相关产品:MDA MB 436细胞、C6细胞、IHH细胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品:GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞
Detroit-562细胞系相关产品:T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
GM 2132细胞系相关产品:GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞
Hs-611-T细胞系相关产品:HCC-202细胞、H-1618细胞、Sol8细胞
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Hs 636.T细胞系相关产品:EFO-27细胞、OKT3细胞、SJRH30细胞
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