"EC-GI-10 Adherent人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
EC-GI-10 Adherent人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。
JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
AM细胞系相关产品：HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞
NIH 3T3细胞系相关产品：AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WML2细胞系相关产品：UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
RKO-AS-45-1细胞系相关产品：SGC996细胞、SuDHL 5细胞、Vero 76 clone E6细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
EC-GI-10 Adherent人食管鳞状细胞癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
WEHI 164 TC细胞系相关产品：Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞
RFL 6细胞系相关产品：BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
FCCH1024细胞系相关产品：751-NA细胞、KBM-7细胞、Emory University-3细胞
SF 763细胞系相关产品：GM2131细胞、RD细胞、HT-29细胞
LAN-1细胞系相关产品：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞
MDA-MB-175-VII细胞系相关产品：SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
SNGM细胞系相关产品：H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
IPI-2I细胞系相关产品：KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞
3T3细胞系相关产品：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞
NCI H69细胞系相关产品：SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞
NCI-H2052细胞系相关产品：KYSE 180细胞、H22细胞、16HBE140细胞
Colon-38细胞系相关产品：CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞
T-HSC细胞系相关产品：SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
EC-GI-10 Adherent人食管鳞状细胞癌细胞系
B16-F10细胞系相关产品：Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞
A375S2细胞系相关产品：H1341细胞、PANC 1005细胞、PNT1-a细胞
A375S2细胞系相关产品：H1341细胞、PANC 1005细胞、PNT1-a细胞
SKES-1细胞系相关产品：EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞
H2110细胞系相关产品：COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
NCI-H220细胞系相关产品：HEC-1A细胞、WM 239细胞、MUTZ1细胞
H226细胞系相关产品：H-1882细胞、SK N SH细胞、CEM.C1细胞
L540细胞系相关产品：MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品：M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
Caki-2细胞系相关产品：SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品：BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
BC-022细胞系相关产品：EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
Hs832T细胞系相关产品：PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
7860细胞系相关产品：HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
PC-9/S1细胞系相关产品：SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
HCC2935细胞系相关产品：GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞
NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：JEG-3细胞、SW 839细胞、MCF-7ADR细胞
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
SVG(P12)细胞系相关产品：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
EA hy 926细胞系相关产品：GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
BNL-HCC细胞系相关产品：Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞
SVEC4-10细胞系相关产品：Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞
HS-68细胞系相关产品：HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞
SNU-638细胞系相关产品：Hu-P-T4细胞、VeroC1008细胞、Anip[973]细胞
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
J774细胞系相关产品：LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
NPC-TW039细胞系相关产品：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
PC-9/GR细胞系相关产品：PC 61-5-3细胞、NCI-H2172细胞、MDA MB 134VI细胞
RenCa细胞系相关产品：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
HeLa 229细胞系相关产品：NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
U-2OS细胞系相关产品：RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
Eca 109细胞系相关产品：HO8910/PM细胞、PC 12细胞、SNU869细胞
ACC2细胞系相关产品：SUDHL-8细胞、GM637细胞、EFO27细胞
Central Adrenergic TH-expressing a细胞系相关产品：MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
MDA-175细胞系相关产品：Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞
MDAMB157细胞系相关产品：MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
EC-GI-10 Adherent人食管鳞状细胞癌细胞系
CAL 62细胞系相关产品：NTC200细胞、TB1 Lu细胞、SP2-0-Ag14细胞
NCIH1694细胞系相关产品：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
CT26.WT细胞系相关产品：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品：SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
A2780/Taxol细胞系相关产品：RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞
Karpas422细胞系相关产品：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞
RBL细胞系相关产品：MMAc.SF细胞、NK92MI细胞、H747细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、CRFK细胞、LL2细胞
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、SK-RC-39细胞、GRSL细胞
FCCH1024细胞系相关产品：751-NA细胞、HCC-1599细胞、TOG细胞
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