"HuP-T4 Adherent人胰腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养更好经验详解:1)收到细胞,首先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察,细胞初步没有问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,次处理也可以依照第二种情况。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HuP-T4 Adherent人胰腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
Ly10细胞系相关产品:SK-LU-1细胞、NRK 52E细胞、HT 144细胞
FTC133细胞系相关产品:HCC1395细胞、HSAS1细胞、HCA 7细胞
578T细胞系相关产品:ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Mel-RM细胞系相关产品:MDAMB436细胞、DR2R1610细胞、SCC 4细胞
SUM 159PT细胞系相关产品:GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品:CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
细胞生长特性:贴壁生长
HuP-T4 Adherent人胰腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
MCF-7/ADR细胞系相关产品:CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
CATH-a细胞系相关产品:M210B4细胞、HCFB(HCF)细胞、Hs-688A-T细胞
H-345细胞系相关产品:V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞
L-540细胞系相关产品:FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞
DU145细胞系相关产品:RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
H-9细胞系相关产品:NCI-H1648细胞、NALM6细胞、H4IIE细胞
RCC-JF细胞系相关产品:HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
A375mel细胞系相关产品:SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞
A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
CAL851细胞系相关产品:CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
RAW264.7细胞系相关产品:SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞
MDAMB134VI细胞系相关产品:R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
SKMEL28细胞系相关产品:Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
HuP-T4 Adherent人胰腺癌细胞系
ABC1细胞系相关产品:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
AM细胞系相关产品:HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
NCIH2591细胞系相关产品:KS-SLK细胞、Mouse Colon 38细胞、Meat Animal Research Center-145细胞
CLL-CII细胞系相关产品:SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞
VM-CUB-1细胞系相关产品:BT-483细胞、SF-126细胞、AU565细胞
HCT8细胞系相关产品:P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞
VM-CUB1细胞系相关产品:HSC4细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞、SW-948细胞
TE-32细胞系相关产品:P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞
HGSMC细胞系相关产品:TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞
H7721细胞系相关产品:OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
RCC-10细胞系相关产品:SKCO-1细胞、OCI-Ly 18细胞、NCIH1355细胞
SU-DHL-4细胞系相关产品:NCI-522细胞、SW 579细胞、NIHOVCAR3细胞
Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品:H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞
Wien133细胞系相关产品:CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞
Clone Y1细胞系相关产品:COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
KNS81细胞系相关产品:3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞
IPLB-SF 21AE细胞系相关产品:SKO3细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、HCC-2108细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品:293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
CMT93细胞系相关产品:SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞
RIN-14B细胞系相关产品:Uhth-74细胞、TE11细胞、TE10细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞系相关产品:QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
ACHN细胞系相关产品:HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞
MBT-2细胞系相关产品:HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
BT细胞系相关产品:OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
BJA-B-1细胞系相关产品:GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品:OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品:EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
T HEECs细胞系相关产品:N1E-115细胞、NALM 6细胞、SHG-44细胞
OCI-Ly7细胞系相关产品:NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
FDCP-1细胞系相关产品:M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞
NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
NCIH2110细胞系相关产品:CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞
MHCC97H细胞系相关产品:Melanoma 14细胞、M-O7e细胞、H2030细胞
NCI-H1755细胞系相关产品:BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞
SupB15W细胞系相关产品:SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
293/EBNA-1细胞系相关产品:SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞
MDCK Type II细胞系相关产品:LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
A549ATCC细胞系相关产品:H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞
HuP-T4 Adherent人胰腺癌细胞系
GM346细胞系相关产品:LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
786O细胞系相关产品:OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
FTC-133细胞系相关产品:SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞
KHYG-1细胞系相关产品:Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
SNU354细胞系相关产品:NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
NCI-H498细胞系相关产品:RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
SNU-C2A细胞系相关产品:AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
Hs 895.T细胞系相关产品:DMS 79细胞、SRA01/04细胞、HOP 92细胞
SKES-1细胞系相关产品:EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
NCI-H1437细胞系相关产品:H2141细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、TW01细胞
mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、TCam 2细胞、NCIH441细胞
H345细胞系相关产品:NPC-TW039细胞、Ca Ski细胞、IMR-90细胞
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