"Detroit 562 Adherent人咽头癌胸水转移细胞系
细胞背景资料:器官:咽头 疾病:癌 取材转移灶:胸水
细胞形态:上皮细胞样
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Detroit 562 Adherent人咽头癌胸水转移细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
【悬浮型细胞的传代操作】1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm 5分钟;2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。【注意事项】1)严格的无菌操作;2)适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。附:EDTA(0.02%四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g,KCl 0.20g,KH2PO4 0.02g,葡萄糖 2.00g,0.5%红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
H-2444细胞系相关产品:CAL85-1细胞、PA-1细胞、NCI-H1341细胞
LK 2细胞系相关产品:MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
VMM39细胞系相关产品:A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU-886细胞系相关产品:SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞
P3/NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞
OLN 93细胞系相关产品:Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
细胞生长特性:贴壁生长
Detroit 562 Adherent人咽头癌胸水转移细胞系
细胞形态特性:上皮细胞
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:1)冷冻时细胞密度过低:推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中;2)不适当的冷冻过程:推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:1)培养瓶的大小:一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从T75培养瓶转移到2或3个T25培养瓶中;2)细胞密度过低:通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
CA-OV-3细胞系相关产品:HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞
COLO-205细胞系相关产品:NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞
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SCC15细胞系相关产品:H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
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