"293GP Adherent人胚肾细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
293GP Adherent人胚肾细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
MV-4:11细胞系相关产品:SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞
RT4细胞系相关产品:U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SW962细胞系相关产品:A375.S2细胞、HTR-8/SVneo细胞、3T6-Swiss albino细胞
C3H10T1/2细胞系相关产品:NCIH1573细胞、PCI-04B细胞、HCEpiC细胞
GM2131细胞系相关产品:RT-112细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、PIEC细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
293GP Adherent人胚肾细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
U-CH1细胞系相关产品:CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
A3细胞系相关产品:SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞
MESSA细胞系相关产品:M109细胞、KYSE-70细胞、L1210细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品:BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
U251MG细胞系相关产品:3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞
COLO678细胞系相关产品:P30 OHK细胞、PANC403细胞、H9细胞
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞系相关产品:VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞
H-1437细胞系相关产品:H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞
CNE-2细胞系相关产品:HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
CAL 85-1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品:NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
293GP Adherent人胚肾细胞系
HC11细胞系相关产品:MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
K299细胞系相关产品:CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品:Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品:Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞
Hs-852-T细胞系相关产品:U-343MG细胞、H-295R细胞、ACC2细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
RPMI-6666细胞系相关产品:SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
HEK 293A细胞系相关产品:ESC-410细胞、LC-1/sq细胞、RGC5细胞
SW 48细胞系相关产品:HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞
H341细胞系相关产品:MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞
H1666_DA细胞系相关产品:RK13细胞、NCI-SNU-387细胞、ARO细胞
SU.86.86细胞系相关产品:D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞
C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
NCIH1373细胞系相关产品:H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞
IM-95细胞系相关产品:A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞
OE-19细胞系相关产品:Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
MODE-K细胞系相关产品:RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞
PG [Human lung carcinoma]细胞系相关产品:NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞
SNK-1细胞系相关产品:CCD 966SK细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-2085细胞
WM 239-A细胞系相关产品:BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
Ra No. 1细胞系相关产品:Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品:OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
M210B4细胞系相关产品:BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
RAW264细胞系相关产品:TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞
FDC-P1细胞系相关产品:CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
HCC2157细胞系相关产品:IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞
OSRC2细胞系相关产品:GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
GalK 1细胞系相关产品:Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
C8166-CD4细胞系相关产品:KRCY细胞、CAL 27细胞、SMMC 7721细胞
Hs 27细胞系相关产品:TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞
Hs 683细胞系相关产品:RDES细胞、Hs606细胞、HuH-6细胞
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
BEL-7404细胞系相关产品:CO115细胞、RPMI.8226细胞、High5细胞
OCI/AML3细胞系相关产品:hRMECs细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、PC.3细胞
AZ521细胞系相关产品:3T6 Swiss Albino细胞、X63Ag8-653细胞、Uhth-74细胞
CHO-ori细胞系相关产品:FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
HIT-T15细胞系相关产品:SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
CCD 966 SK细胞系相关产品:A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞
PL-9细胞系相关产品:IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
293GP Adherent人胚肾细胞系
OCIAML5细胞系相关产品:Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞
U-87 MG细胞系相关产品:LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
MDA-MB-435S细胞系相关产品:Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞
786O细胞系相关产品:OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
HANK细胞系相关产品:BJAB-1细胞、HCT/FU细胞、SUP-B1细胞
PT-K75细胞系相关产品:KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
CT 26细胞系相关产品:NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
H-209细胞系相关产品:253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
ME-180细胞系相关产品:B16BL-6细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、HCC-4006细胞
UO-31细胞系相关产品:Human Kidney-2细胞、GM637A细胞、LM8细胞
MESSA细胞系相关产品:M109细胞、4-1st细胞、HL-60 Clone 15细胞
"