"SNU-668 Adherent人胃癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SNU-668 Adherent人胃癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
RKO-AS-45-1细胞系相关产品:SGC996细胞、SuDHL 5细胞、Vero 76 clone E6细胞
A9(Hamprecht)细胞系相关产品:SCC-15细胞、HCC-1359细胞、PC-14细胞
KYSE0030细胞系相关产品:hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KNS81细胞系相关产品:3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞
NCI-H358细胞系相关产品:OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
MIN-6细胞系相关产品:SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SNU-668 Adherent人胃癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
U-343MG细胞系相关产品:NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞
NCI-H820细胞系相关产品:P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞
HPAF-2细胞系相关产品:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
NCI-H2110细胞系相关产品:E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞
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MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
Tadarida brasiliensis 1 lung细胞系相关产品:JCA-1细胞、SCC15细胞、P30/OHK细胞
Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
SNU-668 Adherent人胃癌细胞系
KG-1细胞系相关产品:SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
CO115细胞系相关产品:SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞
RPMI-8226S细胞系相关产品:RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞
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C32r细胞系相关产品:NB19细胞、HEI193细胞、SF763细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品:CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
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3T3-F442A细胞系相关产品:rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
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HEK-293-FT细胞系相关产品:NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
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KU 812F细胞系相关产品:RPMI-8226S细胞、MRC-9细胞、HCC1171细胞
HOS-143B细胞系相关产品:DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞
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Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品:SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品:HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞
BMDC细胞系相关产品:KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
HHL5细胞系相关产品:NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞
HEK-A细胞系相关产品:LTPA细胞、VAESBJ细胞、NCIH747细胞
RWPE2细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
AK细胞系相关产品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞
Onda 11细胞系相关产品:SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
LL/2 (LLC1)细胞系相关产品:HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞
SU-DHL-10细胞系相关产品:BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞
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LN-229细胞系相关产品:RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
RAG细胞系相关产品:HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞
NCI-H322T细胞系相关产品:Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
M-14细胞系相关产品:SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
H2110细胞系相关产品:COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
Simpson细胞系相关产品:RERFLCMS细胞、TE-9细胞、UMRC-2细胞
SKMEL3细胞系相关产品:H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞
J-111细胞系相关产品:Vero 76 clone E6细胞、LAD2细胞、HT-22细胞
SNU-668 Adherent人胃癌细胞系
Panc 05.04细胞系相关产品:KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞
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GM02219D细胞系相关产品:RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
B16 F10细胞系相关产品:A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
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PC 61 5.3细胞系相关产品:NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
3T3-L1细胞系相关产品:NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞
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TGW-nu细胞系相关产品:SKNEP细胞、P30 OHK细胞、BC-019细胞
HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、SKHEP-1细胞、B35细胞
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