"KM12-SM Adherent人结肠癌肝转移细胞系
细胞背景资料：结肠癌
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KM12-SM Adherent人结肠癌肝转移细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
NK92MI细胞系相关产品：KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
USMC细胞系相关产品：UT7细胞、Hs 840.T细胞、HEK-293-F细胞
ID8细胞系相关产品：IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞
NCI-H1963细胞系相关产品：IMR-90细胞、MSB1细胞、OsA-CL细胞
Panc 8.13细胞系相关产品：BC-3H-1细胞、TOV-112D细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞
细胞生长特性：贴壁
KM12-SM Adherent人结肠癌肝转移细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
IAR-20细胞系相关产品：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
OLN93细胞系相关产品：Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品：32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞
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KM12-SM Adherent人结肠癌肝转移细胞系
LS123细胞系相关产品：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
Lec1细胞系相关产品：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
HL 60细胞系相关产品：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
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ATDC-5细胞系相关产品：KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞
NCIH292细胞系相关产品：HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
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NTERA-2 clone D1细胞系相关产品：NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
PE/CA-PJ-34细胞系相关产品：SK-OV-433细胞、SUM52细胞、S-16细胞
KP 4细胞系相关产品：Saos2细胞、D341Med细胞、CCD 19Lu细胞
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
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MADB 106细胞系相关产品：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
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H-920细胞系相关产品：JVM3细胞、SNU475细胞、NCIH2052细胞
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
CT26WT细胞系相关产品：RAW-264.7细胞、hRMECs细胞、P3JHR-1细胞
SU-DHL1细胞系相关产品：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞
TE-671细胞系相关产品：LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
HOS-143B细胞系相关产品：DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞
DH82细胞系相关产品：IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
IBRS2细胞系相关产品：DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
BPH-1细胞系相关产品：H711细胞、HEK;293细胞、Hs-746T细胞
NK 10a细胞系相关产品：NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
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SK Col 1细胞系相关产品：KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
Li-7细胞系相关产品：NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
NP69SV40T细胞系相关产品：MC3T3E1细胞、HOEC细胞、MGHU1细胞
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MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
U14细胞系相关产品：IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞
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SRS-82细胞系相关产品：BIC-1细胞、MDA-MB415细胞、UMNSAH-DF-1细胞
NCI-H1650细胞系相关产品：P30/0HK细胞、Normal fibroblast-10细胞、SKRC-42细胞
MH7A细胞系相关产品：HOK细胞、Rat 1细胞、kms 11细胞
T-98细胞系相关产品：SKml2细胞、SNU-368细胞、NCI-H2347细胞
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、HANK-1细胞、mREC细胞
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