"CAL-148 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞背景资料:乳腺癌;胸腔积液转移;女性
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CAL-148 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
GLAG-66细胞系相关产品:Molm 13细胞、RPMI7666细胞、SV-HUC-1细胞
Kit225细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RAW-264.7细胞系相关产品:HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
OVISE细胞系相关产品:HCC1954BL细胞、H2087细胞、HM细胞
WM266-4细胞系相关产品:MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
细胞生长特性:贴壁
CAL-148 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
3T3-Swiss细胞系相关产品:SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
SU4细胞系相关产品:NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞
RTMC细胞系相关产品:PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
NCI H548细胞系相关产品:HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
SKRC-42细胞系相关产品:H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
SKBR-3细胞系相关产品:RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
Hs 766.T细胞系相关产品:NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
CaEs17细胞系相关产品:X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞
BE2-C细胞系相关产品:HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞
NIH:OVCAR-5细胞系相关产品:Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞
FRTL 5细胞系相关产品:RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
MHH-CALL-2细胞系相关产品:HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
CAL-148 Adherent人乳腺癌细胞系
R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
SaOS细胞系相关产品:EA.Hy926细胞、RPMI #8226细胞、CWR22R-V1细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
DLD 1细胞系相关产品:PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
Malme-3M细胞系相关产品:NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
870细胞系相关产品:H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
MDA MB231细胞系相关产品:GS-9L细胞、T-ALL1细胞、KMST-6细胞
NCI-H2141细胞系相关产品:KTA-7细胞、Ca9-22细胞、BIC-1细胞
COLO320 DM细胞系相关产品:RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞
CTLL(2)细胞系相关产品:KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞
OE-21细胞系相关产品:Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
P3 88 D1细胞系相关产品:UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
HCC 70细胞系相关产品:Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
TALL1细胞系相关产品:VERO76细胞、293-H细胞、SHZ-88细胞
Immortalized Human Hepatocytes细胞系相关产品:H-7721细胞、H-774细胞、CaES-17细胞
P3J细胞系相关产品:SW48细胞、P3-x63-Ag8 653细胞、CHOK1细胞
AHH-1细胞系相关产品:Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
SUM-102PT细胞系相关产品:MZCRC1细胞、UWB1289细胞、D283细胞
Los Angeles Prostate Cancer-4细胞系相关产品:SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞
HEK-293A细胞系相关产品:ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞
HEK293A细胞系相关产品:NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
MBVP细胞系相关产品:COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞
Epstein-Barr-3细胞系相关产品:SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
Calu 6细胞系相关产品:LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
BGC-823细胞系相关产品:Pa17C细胞、7404细胞、H-2106细胞
MDA-MB-435 S细胞系相关产品:MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞
EnCa1细胞系相关产品:K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
LS123细胞系相关产品:HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
TE-9细胞系相关产品:DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞
NCIH2291细胞系相关产品:Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
50.B1细胞系相关产品:TOV21G细胞、WIL2 S细胞、SW579细胞
HEL-92-1-7细胞系相关产品:HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞
TO175T细胞系相关产品:CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞
KM-12细胞系相关产品:T8细胞、MZCRC1细胞、U-251 MG细胞
H-1882细胞系相关产品:IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞
ECV细胞系相关产品:S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
TH1细胞系相关产品:A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞
CAL-148 Adherent人乳腺癌细胞系
LLC-PK1细胞系相关产品:TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
A 2780 CP细胞系相关产品:SW-620细胞、SKNBE-1细胞、NCI-H1838细胞
CHO cell clone K1细胞系相关产品:HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品:NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
Med 283细胞系相关产品:MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品:U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
Duke University 145细胞系相关产品:M619细胞、D-283 Med细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品:McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
NCIH1688细胞系相关产品:NCI-H23细胞、HECV细胞、HCT 116细胞
Psi2-DAP细胞系相关产品:Ca759细胞、HuTu 80细胞、Ly1细胞
SU4细胞系相关产品:NW38细胞、rRMECs细胞、HCC0078细胞
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