"PG-BE1 Adherent人肺巨细胞癌高转移细胞系
细胞背景资料：肺巨细胞癌
细胞形态：上皮细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较高，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
PG-BE1 Adherent人肺巨细胞癌高转移细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
HCC1954-BL细胞系相关产品：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
Hs683细胞系相关产品：293-F细胞、LK 2细胞、Line 697细胞
H2228细胞系相关产品：Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、N87细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KBM-7/Hap8细胞系相关产品：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞
EOC 20细胞系相关产品：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
细胞生长特性：贴壁
PG-BE1 Adherent人肺巨细胞癌高转移细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？与CO２一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；２)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为５０mM，-２０℃保存，培养基中的终浓度为１mM；３)加入HEPES有何好处？培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH７.２-７.６条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为１M，常温保存。培养基中的终浓度为２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培养基中；４)红的作用是什么？红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；５)谷酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-２０℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基４度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分装使用，-２０℃保存。使用时，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培养基中，使其终浓度为２mM培养基。
LA 4细胞系相关产品：T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞
CHO-ori细胞系相关产品：FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
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PG-BE1 Adherent人肺巨细胞癌高转移细胞系
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