"HHL-5 Adherent人胚胎肝细胞系
细胞背景资料：肝；HPV１６转化；男性
细胞形态：上皮细胞样
细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HHL-5 Adherent人胚胎肝细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
SW 1116细胞系相关产品：WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞
Hep G2/C3A细胞系相关产品：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
NK-92 MI细胞系相关产品：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞
NCI-H125细胞系相关产品：J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
细胞生长特性：贴壁
HHL-5 Adherent人胚胎肝细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
【冻存细胞操作】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０(７)/ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃/min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r/min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０(７)/ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０(５)/ml数量。
Detroit 562细胞系相关产品：SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
CCRF-CEM C1细胞系相关产品：HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
OLN 93细胞系相关产品：Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
Hs 746T细胞系相关产品：APRE-19细胞、KHYG1细胞、EnCa1细胞
RPMI-1846细胞系相关产品：Hs940.T细胞、NCI-HUT-125细胞、HUASMC细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品：BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
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H1355细胞系相关产品：NBL-3细胞、SN-12C细胞、NCI-H250细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
HHL-5 Adherent人胚胎肝细胞系
CP70细胞系相关产品：HUTU80细胞、HEL-92-1-7细胞、NCI-N87细胞
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TE354T细胞系相关产品：A2008细胞、RPMI6666细胞、PANC 813细胞
MSB1细胞系相关产品：LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
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Granta519细胞系相关产品：TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞
NCI-H441-4细胞系相关产品：H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
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Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞系相关产品：LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞
HHL-5 Adherent人胚胎肝细胞系
NCI-H378细胞系相关产品：WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
Detroit-562细胞系相关产品：T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
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C127细胞系相关产品：M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞
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NCI-HUT-125细胞系相关产品：Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞
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Hep 3B2_1-7细胞系相关产品：SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
COR-L23细胞系相关产品：CF Pac1细胞、MDA-MB-134-VI细胞、NBL-S细胞
M20 [Human melanoma]细胞系相关产品：WM115细胞、CAL 78细胞、SUDHL-16细胞
OLN 93细胞系相关产品：Co320细胞、H-1693细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
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